谷胱-甘肽还原酶（GR）测试盒

微量法 100T/96S 

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 

测定意义： 

GR 是广泛存在于真核和原核生物中的一种黄素蛋白氧化还原酶，是谷胱-甘肽氧化还原循环的关键酶之一（通常昆虫中 GR 被 TrxR 取代）。GR 催化 NADPH 还原 GSSG 生成 GSH，有助于维持体内 GSH/GSSG 比值。GR 在氧化胁迫反应中对活性氧清除起关键作用，此外 GR还参与抗坏血酸－谷胱-甘肽循环途径。 

测定原理： 

GR 能催化 NADPH 还原 GSSG 再生 GSH，同时 NADPH 脱氢生成 NADP+；NADPH 在 340 nm 有特征吸收峰，相反 NADP+在该波长无吸收峰；通过测定 340 nm 吸光度下降速率来测定 NADPH 脱氢速率，从而计算 GR 活性。 

自备仪器和用品： 

低温离心机、水浴锅、移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、和蒸馏水 

试剂组成和配置： 

试剂一：液体 120mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂二：粉剂×2 支，-20℃保存。临用前加入 1.2mL 蒸馏水，混匀。 

试剂三：粉剂×2 支，-20℃保存。临用前加入 0.6mL 蒸馏水，混匀。 

粗酶液提取： 

1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 15min，取上清，置冰上待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7秒，总时间 3min）；然后 8000g，4℃，离心 15min，取上清置于冰上待测。

3. 血清等液体：直接测定。谷胱-甘肽还原酶（GR）测试盒