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供货周期 | 现货 | 规格 | 100μl/支/1ml/支 |
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货号 | BFNC86201 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
主要用途 | 仅用于科研 |
Carrier DNA
● 产品规格
产品名称 | 货号 | 规格 | 保存 |
Carrier DNA | BFNC86201-01 | 10μg/μl, 100 µl | -20℃, 12个月 |
Carrier DNA | BFNC86201-02 | 10μg/μl, 1 ml | -20℃, 12个月 |
● 产品说明
Carrier DNA (鲑鱼精DNA) 为短的线形单链DNA,可包裹质粒DNA,在酵母细胞摄取外源质粒DNA过程中发挥作用,促进质粒进入酵母细胞,另外还可保护质粒免于被DNA酶降解。在每次使用前务必进行两次热变性,保证Carrier DNA在转化实验体系中以单链形式存在。
Carrier DNA是青旗生物生产的酵母感受态细胞转化所必需的配套试剂,每个转化反应需要10µl Carrier DNA。
● 操作方法
1. Carrier DNA 在每次使用前要通过加热处理使其变性为单链状态,步骤如下:Carrier DNA 放95℃水浴或金属浴3 min,快速插入冰中,静置3 min,再次放95℃水浴或金属浴3 min,快速插入冰中,静置3 min以上。
2. 取100 µl冰上融化的酵母感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5 µg,Carrier DNA 10 µl,PEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀,30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。
3. 将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。
4. 5000 rpm离心 40 s弃上清,ddH2O 400 µl 重悬,离心 30s弃上清。
5. ddH2O 50 µl重悬,涂板,29℃培养48-96 h。
● 注意事项
1. 在每次使用前务必进行两次热变性,保证Carrier DNA在转化实验体系中以单链形式存在。
2. Carrier DNA 可在4℃短时间保存,如需长时间保存请放-20℃。
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