DNA 凝胶回收试剂盒 返回列表页

使用步骤

使用前请先在漂洗液 Buffer PW 中加入 12 mL 无水乙醇。1.将单一的目的 DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下 (尽量切除多余部分)放入干净的离心管中，称取凝胶重量(去除空管重量)，100 mg凝胶等同于 100 L体积，作为一个凝胶体积注:若回收的 DNA 片用于克隆，须避免紫外照射损伤 DNA。尽量减少紫外暴露时间。

2.向胶块中加入 1 倍体积 Buffer PE(如果凝胶重为 0.1g，则加入100 uL Buffer PE)。50-60C水浴溶胶5-10 min，期间温和地上下翻转离心管，以确保胶块充分溶解。(若胶块的体积过大，可事先将胶块切成碎块。)

3.将上一步所得溶液加入一个吸附柱中，室温放置 1min，12,000rpm 离心 1min，弃废液，将吸附柱放回收集管中。注:吸附的容量为750L，若上步得到的液大于 750L，可分批加入。

4.在吸附柱中加入 300 uL Buffer PE，12,000 rpm 离心 1 min，弃废液，将吸附柱放回收集管中。

5.在吸附柱中加入 700 uL Bufer PW(确认已加入无水乙醇)，12,000rpm 离心 1min，弃废液，将吸附柱放回收集管中。

6.重复一次步骤 5。

7.吸附柱放回收集管后，12.000 rpm 离心 2 min，尽量除尽漂洗液注意:可将吸附柱置于室温放置数分钟，以防止残留的乙醇影响后续的酶反应(酶切PCR等)实验。

8.将吸附柱放入干净的 1.5 mL 离心管中，开盖室温静置 5 min。向吸附膜中间位置加入 30 uL Buffer PB 或 ddHO (洗脱液应先放置于水浴锅中预热) ，室温放置 2 min，12,000 rpm 离心2 min，收集DNA 溶液。

注意:洗脱体积不应小于30 l，体积过少影回收率。为了提高 DNA 的回收量，可将离心得到的溶液重新加回离心吸附柱中，12,000 rpm 离心 2 min，将DNA 液收集到离心管中。回收大于3 KB 片，建议 BuflerPB 预热至55 C以提升回收效率。DNA 也可以用 ddH0 洗脱。DNA 产应保存在-20C以防DNA 降解。