HE/化学染色实验 返回列表页

苏木素(Hematoxylin)-伊红(Eosin)染色法，简称HE染色法。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色提供良好的核浆对比染色，是细胞化学染色常用的一种方法。

实验步骤：

1.        样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/ml，滴加于盖玻片上(置于6孔板中)，培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS 洗涤3次。

2.        样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。

3.        染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤。

4.        分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。

5.        染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。

6.        吹干或自然晾干细胞爬片后，中性树胶封片。

7.        若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可。