流式单标实验 返回列表页

流式单标步骤通常包括以下几个关键环节：

 细胞样品的准备。首先，需要收集目标细胞样品，如细胞悬液或组织细胞液，以获得细胞单层的悬浮液。然后，用PBS洗涤细胞样品，以去除细胞培养基中的细胞培养液和废弃物。¹00001. 制备单标荧光染色试剂。科研人员选择的单标荧光染色试剂是一种粘附于目标细胞表面的抗体探针，这些抗体可以特异性地与目标抗原结合，并发出荧光信号。常用的单标染色试剂有FITC（荧光素异硫氰酸酯）、PE（葡萄糖相映射学）等。

 染色反应。将制备好的单标染色试剂加入之前准备好的细胞样品中，进行充分的染色反应。染色结束后，用PBS洗涤细胞样品，以去除未结合的荧光抗体。

 流式细胞仪分析。使用流式细胞仪对染色实验进行分析，得到关于细胞表面抗原的荧光信号。流式细胞仪可以通过激光照射悬浮细胞，检测细胞表面与标记抗体结合的荧光强度。通过流式细胞仪的检测系统，可以同时分析多个参数，如细胞大小、荧光染色强度和细胞表面抗原的表达水平。²

 数据分析与报告。通过流式细胞仪获得的原始数据可以使用不同的软件进行分析，如FlowJo、Kalisto和Cytobank。这些软件可以检测和计算细胞表面抗原的表达水平，并生成图形和统计结果。