流式JC-1检测 返回列表页

JC-1线粒体膜电位荧光探针染色步骤（流式细胞仪法）：

1. 于6-，12或24-孔板上进行细胞铺板，密度为5×105 cells/mL。37℃，5% CO2培养箱培养过夜。选择合适的化合物根据特定的步骤进行凋亡诱导。 注：进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过1×106 cells/mL，也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。

2. 取0.5 mL细胞悬液至无菌的离心管内；

3. 室温条件400 x g离心5 min；吸掉上清。

4. 用0.5 mL JC-1工作液重悬细胞，于37℃，5%CO2培养箱孵育15-30 min；注意：一般情况，15 min足以进行充分的染色。

5. 室温条件400 x g离心5 min；吸掉上清；

6. 用2 mL细胞培养液或者缓冲液重悬细胞，之后室温条件400 x g离心5 min；吸掉上清；

7. 重复步骤6）；

8. 用0.5 mL新鲜培养液或者缓冲液重悬细胞，即可进行后续的流式分析。注意：请马上进行流式定量分析，此细节很重要。

数据分析：含有红色JC-1聚集物的健康细胞线粒体用FL2通道检测；含有绿色JC-1单体的凋亡或不健康细胞用FL1（FITC）通道检测。