抗体标记（仅供参考）
试验材料：
藻红蛋白：分子量约 240000 道尔顿；PD-10 柱(葡聚糖凝胶层析柱 Sephadex G-25M) ，安玛西亚 Amersham公司产品，产品目录号 No. 17-0851-01； NAP5 柱(葡聚糖凝胶层析柱 Sephadex G-25 DNA grade)， 安玛西亚Amersham 公司产品，产品目录号 No 17-0853-02；琥珀酰亚胺-4-(N- 甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯)(SMCC)，Pierce 公司，产品目录号 No.22360；N-乙基马来酰胺（NEM），Sigma 公司，产品目录号 E-1271；二甲基亚砜（DMSO），Aldrich 公司，产品目录号 No. 27,685-5。
试验方法：
1、藻红蛋白溶液
将藻红蛋白沉淀复溶为溶液，用脱盐柱或超滤管除盐并将其缓冲液置换为20mM 磷酸盐缓冲液，调整藻红蛋白的最终浓度为5-10毫克/毫升。
2、藻红蛋白的衍生化
将琥珀酰亚胺-4-(N-甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯)(SMCC)溶解于无水二甲基亚砜（DMSO）配制成 10毫克/毫升的母液，每毫克的藻红蛋白添加 11 微升的琥珀酰亚胺-4-(N-甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯)
(SMCC)，铝箔封好后于室温旋转反应 60 分钟，使藻红蛋白分子上的氨基与琥珀酰胺反应生成衍生化的藻红蛋白。交换缓冲液预先平衡凝胶层析柱，将衍生化的藻红蛋白过柱，收集藻红蛋白峰。
3、抗体的处理
二硫苏糖醇（DTT）溶解于蒸馏水中，配制成 1 摩尔/升的二硫苏糖醇（DTT）母液，调整抗体的浓度，使其浓度至少为 4 毫克/毫升。
每毫升抗体溶液中加入 20 微升的二硫苏糖醇（DTT）母液，室温静置反应 40 分钟，将抗体的二硫键打开形成巯基。交换缓冲液预先平衡凝胶柱，将反应液过柱，收集抗体部分。
4、藻红蛋白和抗体的共价交联
每毫克抗体加入 3.2 毫克的琥珀酰亚胺-4-(N-甲基马来酰亚胺)环已烷-1-碳酸酯)(SMCC)衍生化的藻红蛋白，铝箔封好后于室温旋转反应 60 分钟，使藻红蛋白分子上的马来酰亚胺基和抗体上的巯基实现共价交联。
10 毫克的 N-乙基马来酰胺（NEM）溶解于 1.0 毫升的无水二甲基亚砜（DMSO）中制成 N-乙基马来酰胺（NEM）母液（现配现用）。每毫克抗体中加入 3.4 微升N-乙基马来酰胺（NEM）母液，铝箔封好后于室温旋转反应 60 分钟， 反应后，使抗体上的巯基封闭。
5、交联物的存储
将交联物于存储缓冲液中透析后保存于2-8℃。
化工仪器网