柱式DNA胶回收试剂盒

柱式DNA胶回收试剂盒是基因 miRNA 聚丙烯酰胺凝胶回收产 miRNABACK (CAT#:70604)
的柱式升级产品，可用于回收 200 nt 以下的小段 RNA，尤其是 20 nt 左右的
microRNA(miRNA)分子。

柱式DNA胶回收试剂盒具有下列特点:
1. 可以回收 15-3000nt 范围内的各种长度的 RNA，包括 100nt 以下的 miRNA
段。
2. 柱式回收法，比沉淀法更见简单快捷。
3. miRNA 回收率在 70%左右。
4. 一站式，即开即用，操作简单，用户不需要自备任何试剂。
5. 扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
规格及成分 成 份 编 号 50 次包装
溶液 A 80203A 15 mL
溶液 B 80203B 15 mL
溶液 C 80203C 15 mL
溶液 D 80203D 40 mL
离心吸附柱 60911 50 套
通用洗柱液 60408 50 mL
RNA 洗脱液 71207 10 mL
使用手册 80203sc 1 份
运输及保存 常温运输,4℃保存(RNA 洗脱液 4℃保存)，有效期一年。
自备试剂 PAGE 胶
使用方法 1. 切取含 miRNA 段的 PAGE 凝胶（100 mg 左右，尽可能多地把多余的胶切
除，否则会影响回收效率），放入 1.5 mL 塑料离心管中，用移液枪头尽可能将
其捣碎（先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎），捣得越细越好。
2. 加入 300 uL 溶液 A。
3. 将离心管水平放置并室温摇晃 3 小时以让 miRNA 从 PAGE 凝胶中扩散出来。
如果回收的 RNA 段长度超过 100 nt，摇晃时间应适当延长。提高温度到
45-65℃，RNA 扩散速度会增加。
4. 12000-15000 g 室温离心 1-2 分钟，将含 RNA 的上清液转移到一个新的 5mL
的塑料离心管中。
5. 加入 300 uL 溶液 B、300 uL 溶液 C 和 750 uL 溶液 D 混合均匀将离心管中
的溶液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后都先静置 3 分钟，然后再
12000-15000 g 离心 1 分钟，倒掉收集管中的液体。
6. 加入 700 uL 通用洗柱液于离心吸附柱中。12000-15000 g 离心 1 分钟，倒
弃收集管中的废液。
7. 12000-15000 g 离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
8. 将离心吸附柱置于一新的干净的离心管（自备）中，加入 25-50 uL RNA 洗脱
液，静置 3 分钟。
9. 12000-15000 g 离心 1 分钟，离心管底部所得溶液即为纯化的 miRNA 溶液，
可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
10. 可以 PAGE 电泳检查回收效率，zui使用基因的高灵敏的超快核酸银染试
剂（CAT#:81104）染色以节约 miRNA 样品的用量。
背景资料 DNA-Silica

结合原理及影响因素（综述,见 2006-2007 目录或）
关联产品 超快核酸银染试剂（CAT#:81104）