DH5a感受态细胞

产品名称：DH5a Chemically Competent Cell

产品编码: G6016

保存条件: -80°C

货号、数量、规格: G6016-20 (20支100u1)、G6016-100 ( 100支100u1)|

pUC19 ( control vector) 10pg/ μ 1; 10μ 1

基因型

F-φ80 lac Z△M15△(lacZYA-arg F) U169 endAl recAl

hsdR17 (rk- , mk+) supE44 λ- thi -1 gyrA96 relAl phoA

操作说明|

1. CLBio DH5a感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中)，加入目的DNA (质粒或连接产物)并用手打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。

2.42°C水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3.向离心管中加入700 μ 1不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)混匀后37°C，200 rpm复苏60分钟。

4.5000rpm离心一分 钟收菌，留取100 μ 1左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37°C培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37°C培养至少17h。

注意事项

1. CLBio感受态细胞建议在冰上融化。冰上放置大约5分钟即可融化，融化后8分钟内加入质粒,否则会影响转化效率。

2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。

3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。