| 铭修（上海）生物科技有限公司
主营产品： 各种标准品、试剂、染色液、培养基、抗体、试剂盒、透析袋 细胞、实验室常规仪器 |
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2017-10-13 阅读(973)
| 提 供 商 | 铭修（上海）生物科技有限公司 | 资料大小 | 55.1KB |
|---|---|---|---|
| 资料图片 | 下载次数 | 103次 | |
| 资料类型 | WORD 文档 | 浏览次数 | 973次 |
组织血管紧张素Ⅰ转化酶2（ACE2）活性荧光定量检测试剂盒产品说明书
（中文版）
主要用途
组织血管紧张素Ⅰ转化酶2（ACE2）活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过三肽化合物底物马尿酰组氨酰亮氨酸，在血管紧张素Ⅰ转化酶1抑制剂的存在下，受到血管紧张素Ⅰ转化酶2的水解，释放出组氨酰亮氨酸，与非荧光性染料邻苯二甲醛反应产生高度荧光的二肽加合物后荧光峰值的变化，来测定组织裂解萃取样品中酶活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品（动物、人体、植物、昆虫等）血管紧张素Ⅰ转化酶2（ACE2）的特异活性检测，以及抑制剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，具有高通量、自动化操作的优点。
技术背景
血管紧张素Ⅰ转化酶（angiotensin I-converting enzyme；ACE；EC3.4.15.1），又称为肽基二肽酶A（peptidyl dipeptidase A）、羧基组织蛋白酶（carboxycathepsin）或激肽酶II（kininase II），是一种体细胞类150至180KD、生殖细胞类90至110KD的多肽外切酶（exopeptidase）和锌金属肽酶（zinc metallopeptidase）。血管紧张素Ⅰ转化酶有2种同工酶：1型和2型，其间80至90%同源。I型主要存在于肺毛细管细胞内，也在血管内皮细胞、肾上皮细胞和睾丸leydig细胞膜中表达；II型主要存在于心脏和肾脏血管内皮细胞膜上。ACE在肾素-血管紧张素-醛固酮（aldosterone）系统中发挥重要作用。作为血管收缩剂（vasoconstrictor），ACE催化十肽血管紧张素I的C末端的组胺酰亮氨酸（histidylleucine）二肽的切离水解反应，转化为血管紧张素II；同时作为血管扩张剂（vasodilator），ACE使缓激肽（bradykinin）失活。ACE常用于药物靶标，治疗高血压（例如噻嗪化物thiazide）、心力衰竭（例如利尿灵furosemide）、糖尿病*和SARS等疾患。基于人工合成的三肽化合物底物N-马尿酰-L-组氨酰-L-亮氨酸（hippuryl-L-histidyl-L-leucine；HHL），在血管紧张素Ⅰ转化酶1抑制剂甲羟孕酮醋酸酯（Foroxymithine）的存在下，受到血管紧张素Ⅰ转化酶2的水解，释放出组氨酰亮氨酸（L-histidyl-L-leucine；HL），与非荧光性染料邻苯二甲醛（o- phthaldialdehyde；OPA）反应，生成高度荧光的二肽加合物后荧光峰值的变化（激发波长360nm，散发波长485nm），来定量测定血管紧张素Ⅰ转化酶2的特异活性。血管紧张素Ⅰ转化酶2反应系统为：
产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
裂解液（Reagent B） 毫升
缓冲液（Reagent C） 毫升
底物液（Reagent D） 微升
终止液（Reagent E） 毫升
反应液（Reagent F） 微升
中和液（Reagent G） 微升
标准液（Reagent H） 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存 底物液（Reagent D）、 反应液（Reagent F）和 标准液（Reagent H）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里； 底物液（Reagent D）和 反应液（Reagent F）避免光照； 终止液（Reagent E）和 中和液（Reagent G）具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月
用户自备
15毫升锥形离心管：用于样品制备的容器
1.5毫升离心管：用于样品制备和储存的容器
超速离心管：用于样品离心的容器
台式离心机：用于样品沉淀
4℃超速离心机：用于分离膜蛋白成分
DOUNCE匀浆器：用于裂解组织细胞
培养箱：用于反应物孵育
比色皿或96孔板：用于比色的容器
荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于荧光分析
实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂置入冰槽里融化。 反应液（Reagent F）避免光照。然后进行下列操作。
