铭修(上海)生物科技有限公司

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活体组织氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒

2017-10-13  阅读(133)

提 供 商 铭修(上海)生物科技有限公司 资料大小 30.5KB
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【详细说明】

活体组织氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒产品说明书(中文版)

 

主要用途

 

 活体组织氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氯荧光乙酰乙酸盐,在组织氧化损伤条件下,产生荧光,来定量检测组织内活性氧族的生成和增加的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适宜于活体动物组织的分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,活体检测,性能稳定。

 

技术背景

 

超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO-次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡。2',7'-二氯荧光乙酰乙酸盐(2',7'-dichlorofluorescein diacetate,DCFH-DA一种*自由通过细胞膜的染色剂。一旦被过氧化氢、过氧化基、过氧亚硝基阴离子等氧化,便产生绿色荧光。据此测定组织细胞内活性氧族的浓度。 

 

产品内容

 

 清理液(Reagent A)    300毫升

 染色液(Reagent B)      1毫升

 稀释液(Reagent C)    200毫升

产品说明书 1份

 

保存方式

 

保存 染色液(Reagent B)在-20冰箱里,严格避免光照;其余的保存在4冰箱里,有效保证6

 

用户自备

 

50毫升锥形离心管:用于组织收集的容器

15毫升锥形离心管:用于工作液配制和组织处理的容器

1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器

6孔细胞培养板:用于组织染色的容器

培养箱或恒温水槽:用于染色孵育

荧光显微镜:用于观察荧光组织

96孔板:用于荧光检测的容器

荧光分光光度仪或荧光酶标仪:用于组织荧光定量检测

 

实验步骤

 

方法一:新鲜组织薄片定性检测

 

实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的 染色液(Reagent B)置入冰槽里融化, 稀释液(Reagent C)放进37℃恒温水槽里预热。然后移出25微升 染色液(Reagent B)到新的15毫升锥形离心管,加入2.5毫升 稀释液(Reagent C),混匀后,将 染色工作液置入暗室里。然后进行下列操作。

 



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