illumina 病毒 v2基因测序试剂盒300次

产品名称：MiSeq Reagent Nano Kit v2(300 Cycles)基因测序试剂盒

产品货号：MS-103-1001

产品规格：

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大输出: 8.5 Gb（500循环MiSeq试剂盒v2），5.1 Gb（300循环MiSeq试剂盒v2），1.2 Gb（300循环MiSeq试剂微试剂盒v2），0.850 Gb（50循环MiSeq试剂盒v2），0.5 Gb（500循环MiSeq Reagent Nano Kit v2），0.3 Gb（300循环MiSeq Reagent Nano Kit v2）

每次运行的大读数: 高达1500万

试剂类型: 配对末端测序，簇生成，合成测序

系统兼容性: 研究模式中的MiSeq，MiSeqDx，研究模式中的MiSeq FGx

技术: 测序

产品介绍：

MiSeq Reagent Kits v2启用更多输出以简化每个MiSeq运行。MiSeq试剂盒v2保留了与v1试剂盒相同的预填充即用型试剂盒，但提供了改进的化学性质，可提高簇密度，缩短循环时间并提高质量（Q）分数。MiSeq Reagent Kits v2还提供微米和纳米格式，适用于低输出应用。

• 获得更快的循环时间，更长的读数和更高的化学成分输出

• 与使用v1套件进行单面成像相比，双表面成像可实现两倍的读数

• 使用500循环套件延长读取长度

• 为您的应用选择*的循环次数（50,300或500）

当与MiSeq系统升级结合使用时，MiSeq试剂盒v2允许双表面成像使每个流动池的可读空间量翻倍。MiSeq Regent Kits v2提供500周期格式，适用于长读取长度，以及流行的50周期和300周期格式。

MiSeq Reagent Kits v2提供标准，微米和纳米配置，可根据特定项目要求和可扩展的输出水平进行调整。

查看产品配置

所有MiSeq试剂组件均采用RFID编码，并与MiSeq系统智能交互，以验证与用户定义的应用程序的兼容性。

还提供MiSeq Reagent Kit v3。它提供600循环格式，允许任何Illumina测序系统具有长的读取长度，或150循环格式，可实现计数应用。

产品名称：illumina 病毒 v2基因测序试剂盒300次        产品货号：MS-103-1001

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Illumina二代测序技术，边合成边测序（SBS），是广泛采用的新一代测序（NGS）技术，负责产生世界上90％以上的测序数据。

Illumina的二代测序技术称为边合成边测序(Sequencing-by-Synthesis,简称SBS)。SBS主要包括碱基延伸、荧光激发及信号收集、剪切等3个步骤。这3个步骤可以重复，循环进行。每循环一次测定一个碱基。想测定多少个碱基（即读长），就循环多少次。测序循环次数可以在软件里设定。到底测序多长合适，要根据项目性质和需求来决定。大多数情况下，SR实验（单端测序）测定1x50个碱基，PE实验（双端测序）测定2x150个碱基。

1 碱基延伸

Illumina测序试剂里所使用的dNTP级具特色，它们同时具有两个修饰基团：一个荧光基团，一个可逆终止基团。A、G、C、T 4种碱基分别标记4种不同的荧光基团，它们在不同波长的激光激发下，能够发射不同波长（即颜色）的荧光。荧光颜色与碱基种类一一对应，因此根据激发光的波长可以识别碱基。4种碱基的终止基团是一样的。由于终止基团的存在，所有dNTP每次都只能延伸1个碱基，无论给予多长的反应时间。又由于该终止基团是可逆的，在荧光信号收集完毕之后，可以用剪切剂切除该终止基团，使碱基恢复自然的可延伸状态，这时即可继续进行下一轮循环，再测定一个碱基。

可逆终止基团技术是Illumina二代测序的一大特色。它与桥式PCR技术一起，构成了Illumina二代测序的两大支柱，为稳定获得高质量的测序数据打下了坚实的基础。

2 信号采集

HiSeq系列测序仪具有红绿两根激光管，两个滤色片。它们两两组合，可以形成4种不同的激发波长，正好分别用于激发A、G、C、T 4种碱基。

Cluster上所标记的荧光基团在激光激发下产生的信号，可以用相机拍摄或者扫描的方式收集信号。扫描技术速度比较快，被X10系列采用。由于FC面积比较大，而且上表面和下表面要分别拍照，所以拍照过程相当耗时。对于经典的HiSeq 2000来说，一次测序循环所产生的荧光信号，需要大约40分钟的时间才能拍照收集完毕，时间比测序反应本身还要长。

3 剪切

荧光信号收集完毕后，关闭激光，用剪切剂去除测序引物的延伸产物上的碱基所标记的荧光基团和终止基团。两个修饰基团均被切除，一方面消去干扰荧光，一方面使链末端的碱基回复到自然的可延伸状态，为下一轮测序做好准备。

再重复合成、激发、收集等步骤，即可进行第二个碱基的测序。

测序循环可以重复多次。理论上可以一直重复，直到信噪比降低得无法有效识别碱基信号为止。由于荧光基团的发光效率持续不断在衰减，Taq酶的活性也在持续不断地衰减，所以实际上测序循环次数是有限的，大重复次数与sbs试剂的配方有关。测序的循环次数可以在软件设置过程中人为，这个重复次数就是每个测序片段的读长。目前，Illumina平台的读长有2x100 bp，2x125 bp，2x150 bp，2x300 bp等多种，其中2x150 bp用得zui广泛。

单端测序：单端测序(Single-read)首先将DNA样本进行片段化处理形成200-500bp的片段，引物序列连接到DNA片段的一端，然后末端加上接头，将片段固定在flow cell上生成DNA簇，上机测序单端读取序列。

双端测序：双端测序(Paired-end)方法是指在构建待测DNA文库时在两端的接头上都加上测序引物结合位点，在di一轮测序完成后，去除di一轮测序的模板链，用对读测序模块(Paired-End Module)引导互补链在原位置再生和扩增，以达到第二轮测序所用的模板量，进行第二轮互补链的合成测序。

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