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上海莱睿科学仪器有限公司
主营产品： 安捷伦液相色谱仪,气相色谱仪,尼高力红外光谱仪,IKA磁力搅拌器,TOMY高压灭菌锅 |
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2017-11-1 阅读(1454)
郁李仁为蔷薇科植物郁李、欧李、榆叶梅、长梗扁桃等的种仁。郁李仁种子含苦杏仁甙，苦杏仁苷一般指维生素B17。它在化学上是两种糖分子，即苯甲醛(benzaldehyde)和氰化物(cyanide)的化合物，作为药剂，又称Nitrilosides。苦杏仁苷可特异性地抑制阿脲所致血糖升高,作用强度与血液中苦杏仁苷浓度有关。苦杏仁苷还具有抗凝血作用。
传统采用采用银量法测定，但银量法属于间接测定方法，影响因素多，目前采用其他方法对郁李仁进行含量测定的报道较少。使用液相色谱仪直接测定郁李仁中苦杏仁苷的含量，方法准确、可靠，为郁李仁中苦杏仁苷的含量测定提供了依据和参考。
一、仪器与试药
1仪器：
Waters液相色谱仪，Waters2487紫外检测器，ZW色谱柱，恒温箱，Empower色谱工作站，Agilent手动进样器（20μL）；十万分之一电子分析天平，Cary60紫外分光光度计。
waters液相色谱仪HPLC
1.2试药：
苦杏仁苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110820-200403）；郁李仁药材，经鉴定分别为蔷薇科植物郁李和长柄扁桃的干燥成熟种子。乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
二、方法与结果
2.1色谱条件色谱柱：SupelcoODSC18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-水（20∶80）；柱温：25℃；流速：1.0mL/min；检测波长：210nm，进样量：20μL。
2.2对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥12h的苦杏仁苷对照品42.32mg，置10mL量瓶中，用70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得苦杏仁苷4.232mg/mL的对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备取郁李仁粗粉0.3g， 精密称定，置具塞三角烧瓶中，加石油醚（60～90℃）50mL，回流提取1h，过滤，以石油醚分3次洗涤滤渣及容器，每次10mL，弃去石油醚液，滤纸 及滤渣挥干溶剂，置原容器中，精密加入70%甲醇溶液50mL，精密称定，回流提取1h，放冷至室温，再称重，用70%甲醇补足失重，抽滤，精密量取续滤 液5mL置10mL量瓶中，以70%甲醇稀释至刻度，以0.45μm滤膜滤过，取续滤液即得。
2.4线性关系考察精密量取苦杏仁苷对照品溶液1mL置10mL量瓶中，用70%甲醇稀释至刻度，再依次稀释，制得含苦杏仁苷211.6、105.8、52.9、26.45、13.225、6.6125、3.30625μg/mL的对照品溶液。分别精密吸取各20μL进样测定，以峰面积积分值对浓度进行回归分析，得苦杏仁苷回归方程为：Y＝22645X＋10860，r＝1.0000；苦杏仁苷线性范围为0.06613～4.232μg。
2.5精密度试验精密吸取同一供试品溶液重复进样6次，测得苦杏仁苷峰面积积分值的RSD＝0.86%。
2.6重复性试验取同一批次样品6份，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按照“2.1”项下色谱条件测定，结果苦杏仁苷的平均含量为3.16%，RSD＝1.35%。
2.7稳定性试验取同一供试品溶液于配制后0、2、4、6、8、10、24h测定，计算峰面积RSD＝1.11%，表明供试品溶液在24h内稳定。
2.8加样回收率试验精密称取已知含量的同一批次（批号080121）郁李仁粉末6份，每份约0.15g，脱脂后分别精密加入4.232mg/mL的苦杏仁苷对照品溶液1mL，依法制备供试品溶液并测定。
2.9样品含量测定分别测定了小李仁、大李仁药材各3批，采用外标法计算苦杏仁苷的含量，结果符合要求。
