色氨酸羟化酶（Th）ELISA 试剂盒 Tryptophan hydroxylase Assay Kit！本公司长期经营代理试剂盒，价格实惠，质量保证，价格请咨询在线人员。
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色氨酸羟化酶（Th）ELISA 试剂盒
夹心法
夹心法常用于检测大分子抗原，一般的操作步骤为:
将具有专一性的抗体固著（coating）于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体
加入待测检体，检体中若含有待测的抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结
洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一的一次抗体，与待测抗原进行键结
洗去多余未键结一次抗体，加入带有酶的二次抗体，与一次抗体键结
洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果
色氨酸羟化酶（Th）ELISA 试剂盒
用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性：有高度的活性和敏感性；在室温下稳定；反应产物易于显现；能商品化生产。当前应用较多的有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP应用广。
过氧化物酶广泛分布于植物中，辣根中含量高，从辣根中提取的称辣根过氧化物酶（HRP），是由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉构成的一种糖蛋白（含糖量18%），分子量约40 000，约由300个氨基酸组成，等电点为pH 3-9，催化反应的适pH值因供氢体不同而稍有差异，一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%饱和度以下的硫酸铵溶液。酶蛋白和辅基的大吸收光谱分别为275nm和403nm。
酶的纯度以RZ表示：RZ=OD403/OD275
纯酶的RZ多在3.0以上，高为3.4。RZ在0.6以下的酶制品为粗酶，非酶蛋白约占 75%，不能用于标记。RZ在2.5以上者方可用于标记。HRP的作用底物为过氧化氢，催化反应时的供氢体有几种：（1）邻苯二胺（OPD），产物为橙色，可溶性，敏感性高，大吸收值在490nm，可用肉眼观察判别，容易被浓H2SO4终止反应，颜色可在数小时内不改变,是目前国内ELISA中常用的一种；（2）联大茴香胺（OD）,产物为橘黄色，大吸收值在400nm，颜色较稳定；（3）5－氨基水杨酸（5－AS）：产物为深棕色，大吸收值在449nm，部分溶解，敏感性较差；（4）邻联甲苯胺（OT）产物为蓝色，大吸收值在630nm，部分溶解，不稳定，不耐酸，但反应快，颜色明显。
工作原理
本试剂盒采用双位点夹心酶联免疫吸附法（ELISA），测定样品中的水平。向预先包被抗体的酶标孔中加入标准品、待测样本和HRP标记的抗体，经过温育和洗涤，去除未结合的组分，然后再加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅与样品中的浓度呈正相关。
