【简单介绍】
【详细说明】
美洲锥虫核酸质控(PCR)
广州健仑生物科技有限公司
本司长期供应尼古丁(可替宁)检测试剂盒,其主要品牌包括美国NovaBios、广州健仑、广州创仑等进口产品,国产产品,试剂盒的实验方法是胶体金方法。
我司还有很多违禁品检测、激素检测、疫病类检测、肿瘤标志物检测等抗原抗体原料,还有荧光FITC标记类抗体、各种可标记单抗以及免疫磁珠等等产品以及各种生物原料和核酸质控品等,。
我司还提供其它进口或国产试剂盒:登革热、疟疾、流感、A链球菌、合胞病毒、腮病毒、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌、化妆品检测、食品安全检测等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。
美洲锥虫核酸质控(PCR)
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(PCR)
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【公司名称】 广州健仑生物科技有限公司
【】 杨永汉
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【公司地址】 广州清华科技园创新基地番禺石楼镇创启路63号二期2幢101-3室
【企业文化宣传】(PCR)
1. OsAGAP原位杂交正义、反义探针制备
对OsAGAP cDNA全长喺GenBank中做BLAST分析,捞取招异性zui强嘅片段(767bp-987bp)用于探针制备,据此设计5’四引子:5’-CTC TCA AAC TGC AAGCGT-3';三’四引子:5’-CAG CTC CTG CCT CAC CT-3'。将利用呢对引子扩增到嘅OsAGAP(767bp-987bp)片段,分别就以正向同反向链接到T easy载体上,用于探针制备。
利用DIG T7/SP6 Labeling kit(Roche)嚟做正义同反义探针嘅嘅高辛识认,反应程式依据其用户手册放。正义、反义探针分别就采用T7、SP6 RNA polymerase进行识认。攞线性化嘅质粒模板1ug,加DEPC处理嘅双蒸水至13ul;理中加:
10 X NTP labeling mixture 2ul;
10 X Transcription buffer 2ul;
RNase inhibitor 1ul;
T7/SP6 RNA polymerase 2ul。
轻柔捞匀之后,37℃,温育2hr;加2ulRNase-free嘅DNase15min,抹得甩DNA模板;37℃,温育电泳肯定探针标好同模板抹得甩后,加2ul0.2M嘅EDTA(pH8.0)终止反应;加2.5ul4M LiCI,lul l0mg/ml tRNA同75ul无水乙醇,捞之后,-20℃沉淀过夜;4℃,13000rpm离心10min,去上清;沉淀用70%乙醇洗2次;超净系台吹干,溶于100ulDEPC处理嘅ddH2O中,55℃温育l0min,分装、存于-70℃士啤。
いち。OsAGAP元交雑正義、反義プローブ調製
OsAGAPにcDNA全長我GenBankでBLAST分析し、zui強の断片をすくう異性(767bp-987bp)用プローブ調製、この設計ご』の四プライマー:ご」- CTC TCA AAC TGC AAGCGT-3 ';3』の四一声:ご」- CAG CTC CTG連続冷却変態CAC CT-3 '。を利用してねまくら増幅OsAGAP(767bp-987bp)までの断片を、それぞれ同じでは逆にリンクeasy担体にT用プローブ調製。
利用DIG T7 / SP6 Labeling kit(Roche)して大量に正義と反義プローブの意識の高い辛見分けて、反応によってそのプログラムマニュアル。正義、反義プローブがそれぞれ採用T7、SP6 RNA polymeraseを識る。破る線形化の1ugプラスミドテンプレートに加え、DEPC処理の双蒸水から13ul ;理に加:
じゅうX NTP labeling mixture 2ul、
じゅうX Transcription buffer 2ul、
RNase inhibitor 1ul、
T7 / SP6 RNA polymerase 2ul。
なめらかに均等にすくい後、37℃で、インキュベーション2hr;2 ulRNase-freeのDNase15min拭いて、振られDNAテンプレート; 37℃で、インキュベーション電気泳動肯定プローブ標いいつけて同テンプレートに振られた後、2 ul0.2MのEDTA(pH8.0)停止反応;加2.5ul4M LiCI、lul l0mg / ml tRNA同75ul無水エタノール、すくい取って- 20℃の瀋殿泊まります;4℃で、13000rpm遠心10min、清;瀋殿で70%エタノール2回入る;超純係台溶け、乾い100ulDEPC処理のddH2Oで、55℃インキュベーションl0min、充填、在庫は- 70℃士ビール。
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