天津谱祥伟业科技有限公司

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岛津氨基酸分析包

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  • 天津谱祥伟业科技有限公司
  • 2016-08-22 16:39:01
  • 天津市
  • 岛津
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【简单介绍】

18种氨基酸 出峰顺序依次为1--天冬氨酸ASP、2--谷氨酸GLU、3--丝氨酸SER、4--谷氨酰胺Gln、5--组氨酸HIS、6--甘氨酸GLY、7--苏氨酸THR、8--瓜氨酸CIT、9--精氨酸ARG、10--丙氨酸ALA、11--色氨酸TYR、12--半胱氨酸CYSTINE、13--缬氨酸VAL、14--蛋氨酸MET、15--苯丙氨酸PHE、16--异亮氨酸ILE、17-亮氨酸LEU、

【详细说明】

品牌 SHIMADZU/岛津

柱前衍生同时分析18种氨基酸

岛津氨基酸分析包样品信息:

18种氨基酸 出峰顺序依次为1--天冬氨酸ASP、2--谷氨酸GLU、3--丝氨酸SER、4--谷氨酰胺Gln、5--组氨酸HIS、6--甘氨酸GLY、7--苏氨酸THR、8--瓜氨酸CIT、9--精氨酸ARG、10--丙氨酸ALA、11--色氨酸TYR、12--半胱氨酸CYSTINE、13--缬氨酸VAL、14--蛋氨酸MET、15--苯丙氨酸PHE、16--异亮氨酸ILE、17-亮氨酸LEU、18--赖氨酸LYS

检测目的:在线柱前衍生分析18种氨基酸

岛津氨基酸分析包检测原理:
岛津prominence 20A UFLC系统升级后,可以在定量环内实现柱前在线衍生。
衍生时,进样针首先吸取硼酸buffer到定量环(硼酸buffer pH值7.0,在碱性条件下衍生效果更好)----再吸取OPA和3-巯基丙酸的混合液(OPA衍生一级胺,3-巯基丙酸保护氨基酸),----再吸取FMOC(FMOC衍生二级胺)----zui后吸取氨基酸标准品溶液---混合充分反应,进样分析。

检测方法:标准品储备液,稀释后衍生进样分析

分析仪器:岛津prominence 20A UFLC系统

条件:

色谱柱: Inertsil ODS-4 3um 4.6*150mm 货号:5020-04045
流动相: A:水(40mM磷酸盐,Ph7.0) B:乙腈/甲醇/水=45:45:10
流速: 1.0ml/min
柱温: 40℃
检测器: UV,262nm、338nm
进样量: 1ul
衍生剂配制方法:  
OPA配制: 10mgOPA溶于1ml溶液(0.16ml甲醇+0.14ml硼酸缓冲液+0.7ml纯水)
3-巯基丙酸: 10ul 3-巯基丙酸用纯水稀释至1ml
硼酸缓冲液: 0.1mol/L,用0.4mol/L的氢氧化钠调节pH值至10
FMOC: 10mgFMOC溶于1ml乙腈
梯度条件,见表1:  

 

表1 梯度条件
time(min) Module Command Value
2.5 pumps pump B Conc 13
2.51 pumps pump B Conc 15
10 pumps pump B Conc 16
15 pumps pump B Conc 35
26 pumps pump B Conc 42
26.01 pumps pump B Conc 100
29.5 pumps pump B Conc 100
29.51 pumps pump B Conc 12
35 controller stop  

 

图谱如下:

图谱1

 

重现性:

表3 保留时间与峰面积重现性结果(浓度为2 umol/L,n=6)
峰号 RSD%(RT) RSD%(Area)
1 0.16 1.84
2 0.05 2.18
3 0.1 0.72
4 0.09 0.70
5 0.08 1.09
6 0.09 1.07
7 0.09 0.73
8 0.1 0.85
9 0.1 1.03
10 0.06 0.66
11 0.04 0.87
12 0.06 0.88
13 0.06 0.65
14 0.07 0.97
15 0.09 0.86
16 0.05 0.67
17 0.09 0.77
18 0.11 0.93

图2 保留时间与峰面积重现性图谱

 

另外 提供氨基酸检测分析方案及全套设备,分析设备。

 

    
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