前言
无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。多数恶性肿瘤的血管生成密集且生长迅速。因此,血管生成在肿瘤的发展转移过程中起到重要作用,抑制这一过程将能明显阻止肿瘤组织的发展和扩散转移。于是体外的血管生成实验就能很好的模拟肿瘤的血管发生过程,并且适合研究药物对这一过程的影响实验。本实验以HUVEC细胞为例,介绍这一实验的详细过程。
图1 培养皿底部带计数格坐标
图2 培养皿底部计数格的示意图
步骤:找到感兴趣的细胞后,记下细胞的坐标信息(横坐标是字母,纵坐标是数字),下次再观察时,根据坐标信息找到细胞的位置,即可继续观察同一个细胞。
拓展应用:
1.底部的计数格可直接用于细胞计数,计数细胞无需转移到计数板了;
图3 边长500微米的计数格
图4 边长50微米的计数格
2.锁定感兴趣的细胞,直接在培养皿里做免疫荧光实验
图5 小鼠免疫荧光染色效果(使用ibidi 35毫米培养皿的实验效果)
如何选择不同规格的计数格培养皿/载玻片?
根据实验目的来!
*指倒置荧光显微镜,共聚焦显微镜等显微镜
**使用玻璃底的产品还可以有配套的盖子进行DIC活细胞成像
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