目前,Elisa方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。在Elisa试剂盒操作中,影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。如果在实验中遇到显色弱灵敏度低的问题,是什么原因造成的呢?
下面,上海劲马就为大家分析一下可能的原因。
常见实验问题:实验结束后,包括阳性对照、质控在内的所有板孔的颜色均较淡。
?可能原因:
1、试剂盒超过有效期;
2、试剂盒没有按规定进行保存,受高温影响。
3、试剂、样品用前没有平衡至室温;
4、加入试剂的体积和时间有误,移液器计量不准,吸嘴内水分太多或不清洁;
5、洗板及加样过程中,酶标受污染失活而失去催化显色的能力;
6、温育时间及温育温度未达到要求;
7、洗板次数太多,或浓缩洗液稀释倍数不符合要求;洗涤冲击力太大,浸泡时间太长;
8、显色剂加入量不足或顺序颠倒,或混合后加入;
9、底物作用时间不够;
10、蒸馏水水质有问题。
常见实验问题:实验结束后,阴阳性对照正常,质控正常,但临床标本感觉显色较弱。
1、待测标本中可能不含强阳性标本,故结果可能是正常的;
2、标本加入叠氮钠作为防腐剂。
常见实验问题:阴阳性对照正常,但质控、参考品或个别弱阳性标本未能检出。
1、未达到要求的温育温度及温育时间;
2、仪器设定不正确,滤光片不匹配。
常见实验问题终止后,目测结果正常,但酶标仪读值结果偏低。
1、酶标仪参数设定不正确。
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