SDS-PAGE胶染色

来源：上海士锋生物科技有限公司 2015年06月01日 08:50

一、各种蛋白染色方法的灵敏度比较

二、考马斯亮蓝染色

CBB 染色液：0.5%考马斯亮蓝 G250 或 R250；40%甲醇；10%乙酸；将 CBB 溶于甲醇中并不停的搅拌 15min。

加入乙酸与 ddH₂O 脱色液：30%甲醇；10%乙酸

染色方法：1. 在摇床上染色 30min；2. 脱色至蛋白点或条带清晰可见；3. ddH₂O 洗 3-5 次。

三、胶体考马氏亮蓝染色 ColloidalCoomassie Staining（Cambridgecentrefor porteomics）

sensitivity = ~100ng

1. 固定：甲醇/ 醋酸/H₂O(45:1:54)至少 20min.

2. 染色 12-18hr。

染色液： 17% (w/v) 硫酸铵；34%甲醇；0.5%醋酸；0.1% (w/v) CoomassieG250。

3. 脱色：用 H₂O 脱色至蛋白点和背景清晰.

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