奥林巴斯显微镜

——

冷冻断裂装置技术应用

奥林巴斯显微镜的断裂在特殊的冷冻断裂仪中进行。冷冻断裂仪有多种商品出售，其

复杂程度也有很大差别，

但原理都是相同的，

它们都是一个真空喷镀仪和一个冷冻断裂装置

组成的。现以本室的日立

HHS

一

5GB

冷冻断裂仪为例说明其原理。

  奥林巴斯显微镜的冷冻断裂装置。其主要部件有两个：刀座和样品座，均由导热良

好的铜制成。

刀座上安置一刀片，

它可沿样品座上的导轨顺斜面下滑。

样品座上可安放样品

杯。当拉动塑料支撑块时，刀座下滑，将样品切断。在刀座上方与前方各有一孔，供喷铂与

喷碳用。样品座上可装上蚀到加温器，使样品升温。刀座前还有一隔热板，

以阻挡喷镀时的

热辐射。为保证整个装置有良好的导热、

滑动与切断性能，每次使用前均应认真擦拭，

除去

上面的油污、水份和氧化层。必要时可用抛光膏，丙酮清洗表面。

  奥林巴斯显微镜使用时，将刀座和样品座置入液氮中冷冻待液氯停止沸腾后，取出，

并在室温下迅速将经过冷冻的样品连同样品杯一

‘

起装到样品座亡，再将刀座放在样品座导

轨上方，下面垫以塑料文撑块，

插攒舶入隔热板，

然后将整个装置再次故人液氮冷却。

待液

氯沸腾停止，

立即提出，

放到真空明镀仪的喷镀台上，

技上支撑块的拉绳，

接通温度控制器，

盖放真空罩开始抽真空。

 奥林巴斯显微镜真空喷铵仪内的真空度达到样品温度时，通过快门把手迅速拉动真

空罩内的支撑块，

刀座即从样品座的斜面上滑下，

并将样品切断，

在样品杯内留下一个带裂

面的样品。

 有时奥林巴斯显微镜需要研究腹表面的结构，这就要使样品慢慢升温，令冰升华，把

膜内外表面暴露出来，这一过程称为蚀到。蚀刻速度与温度和真空度有关。

具体作法是，在

样品断裂后．在的真空度下，用蚀刻加温器使样品温度慢慢升至，并在该条件下维持

3

一

10

分钟。

奥林巴斯显微镜的断裂或蚀刻后的样品均需喷镀。

喷镀的目的是在暴露的样品表面造成

一个连续的，具有足够反差并富有立体感的薄膜，印制备样品表面的复型。

 奥林巴斯显微镜喷镀分两步进行。

先在与样品成

45

。

A

的方向通过喷铂孔喷镀。

为此，

先要在的真空度下，使带有钥珠的碳棒预热，再加大电流使铂在

2

—

3

秒钟内熔融气化，当

刚刚出现碳花时，即终止通电。第：

：步为喷碳，其喷镀方向与样品表面垂直。每次喷碳时

间为

1

秒，

总计可喷

4

—

5

次。

每次间隔

3

—

4

秒。

间歇喷碳的目的是防止样品因过热而发生

蚀刻。喷碳是为了在样品表面形成一个连续的膜。喷铂与喷碳的方向。

 以上所述的奥林巴斯显微镜冷冻超薄切片制备法适用于形态，

细胞化学或免疫标记研

究。

制备过程中样品要通过一系列的水溶性介质，

可称为湿法。

湿法会使样品中的可溶性成

份流失，因此不能用于这些成份的研究。

为研究绍胞中的可扩散的，水溶性成份，

应当使用

于法制备超薄切片。