色氨酸检测方法

一、标准溶液的配置

　　准确称取色氨酸标准样品0.0204g，用0.1mol/L氢氧化钠水溶解并定容至50mL，则色氨酸浓度为2μmol/mL，即20.42mg/100mL。

二、5mol/L的氢氧化钠的配置方法：

　　准确称取200g氢氧化钠，用水溶解并定容至1L。

二、前处理方法

1、水解：准确称量0.3-0.5g样品于水解管中，加入5mol/L氢氧化钠10mL，放置30分钟以上后再封口，放入145℃烘箱中4小时，取出放凉后，直接用漏斗转入50mL容量瓶中，用6mol/L盐酸中和到中性，用水定容，取适量过0.45μm的滤膜用于衍生。

2、衍生：a、准确吸取10ul过滤好的样液注入小试管中。

         b、将小试管放入真空瓶中，在真空泵上抽滤20分钟，抽滤好后用镊子取出小试管，看小试管中还有没有未抽干的样液。

         c、往抽干的小试管中注入20ul衍生缓冲液放在混匀器上混匀2分钟，混匀好后再在小试管中注入20ul衍生试剂，再放在混匀器上混匀2分钟。

         d、用封口胶将混匀好的小试管封口。（封口时要注意不能有漏的地方）。

         e、将封好口的小试管放入60℃的烘箱里烘30分钟。

         f、将烘好的小试管上的封口胶取掉，用移液枪准确移取160ul的平衡缓冲液注入小试管中，在混匀器上混匀2分钟就可以进样了。

注意事项：

1、 样品加完氢氧化钠后，要放置30分钟以上再封口，防止在烘箱中进行水解反应时爆炸。

2、 从水解管中转入容量瓶时，直接转移，不用滤纸过滤，因为碱对滤纸有腐蚀性。

3、 注意检查小试管有没有抽干时一定不要倒置，防止有为抽干的样液损失。

4、 封口时一定要封严。

除氨基酸分析方法包外海需要如下：

需要准备的试剂：

色氨酸标准品，氢氧化钠，盐酸

需要准备的耗材：

0.45μm的滤膜，50mL容量瓶，移液器枪头200ul，封口膜，

需要的仪器：

天平，烘箱，移液器200ul