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多肽小常识2

来源:上海长怡生物技术有限公司   2010年05月29日 17:15  

存:
  大多肽在-20很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,的方法是以小的工作样量存放。
  对于含Cys, Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解*,因为这种多肽可易空气氧化, 在封瓶前,慢慢流过多肽的氮气或氩气也会降低氧化作用。含GlnAsn的多肽也容易降解,所有这些肽与不含这些有问题解苷的那些肽相比,生命期有限。

溶解性:

  大多肽的道选溶剂是超纯抽气水。稀乙酸或氨水分别对于碱性或酸性多肽的溶解很重要。这些方法不溶的多肽, 需要DMF、脲、guanidiniam chlorideacetonitnle来溶解,这些溶剂可能某些实验有副作用。所以我们建议设计多肽时要加注意。
  残基Ala, Cys , Ile, Leu, Met, PheVal将全增加多肽的溶解难度。
  您需要特殊的多肽或任何技术帮助,请随时与我们。 我们包你*满意,对于我们不能适当合成的顺序,我们不收费。

多肽的保存和操做
  包装 1mg或更少的多肽按净重包装,声明的小瓶重不含相关抗离子和水。 例如,氨基酸分析决定的肽含量是80% 1mg样品中,那么瓶中毛重是1.25mg
  大量的多肽以毛重算。标出的重量含相关抗离子和水, 例如,25mg样品中肽百分比为90%,那么,实际肽量为25mg×90%=22.5mg
  不要把肽含量和纯度搞混了。肽的纯度可能是100% 而肽含量相关带电基团(如Arg, Lys )的抗离子量和肽新水性决定。这是合成肽的本身特性。


冻干肽的保存
  所有产品应存于冰箱, -20。多数肽以此方法可以存放几年不变。
肽溶液的保存
  溶液肽远比冻干形式不稳定,溶液应为中性pH(pH5-7), -20保存的,为避免样品的反复冻融, 分成小样存放。一份样品融冻后未用完, 应扔掉,细菌降解有时会成为溶液肽的麻烦, 为克服此,肽应溶于无菌水, 或肽溶液用0.2μ M滤膜过滤。
多肽的重建和操作
  多数肽溶于无菌蒸溜水。初次溶解时,要注意使初始浓度比要求浓度大,如果多肽仅有限溶解性, 这便允许加入其它溶解剂或缓冲盐。
  如果多肽在水中的溶解性有限,有几种选择可帮助溶解:
  对碱性肽用稀乙酸(含Arg , Lys , His
  酸性肽用稀氨水(含Asp, Glu
  对极疏水的肽用10%有机修饰物(Acetonitnile , Methanol
  极不溶的肽用DM50DMF
  guanicline hydrochloride或脲的浓溶液也很有用, 与上述方法合用, 声处理也是溶解多肽的有效手段。

多肽的包装
  目录中所有多肽除特别说明外,纯度为95~98%。包装为小瓶冻干粉。除特别注明外,多肽净重包装, 例如,1mg瓶的β-amyloid 1-401mg的多肽。多肽净重由氨基酸分析得到的肽含量计算。例如,一个多肽样品毛重5mg,氨基酸含量85% 多肽净重为5mg×0.85=4.25mg。请注意,多肽含量不是多肽纯度,与抗离子象乙酸盐和溶剂,特别是水结合量合成多肽的本身特性。多肽纯度可能达100%,但合成品中多肽含量由氨基酸组成,硫水性, 和多肽对溶剂和离子的暴露决定,特别是在纯化过程中,无论多肽如何纯,冻干粉多肽含量一般为70-85% 剩余15-30%由其它基本非肽成份构成。
多肽应用和保存
  多肽具广泛的溶解性。多肽不溶的主要问题是形成二级结构。除了zui太肽外,这点都会发生, 在有多重疏水残基的肽中更显著。盐会促进二级结构形成。我们建议先在无菌蒸馏水或去离子中溶解多肽。如需要增加溶解率,可用声处理。溶解仍有问题, 加少量稀乙酸(10%)或氨水,会便于溶解。
  要长期保存多肽, 冷冻干燥,冷干粉可在-20或更低存放几年而很少或无降解。溶液中的多肽远不稳定。 多肽易受细菌降解,应用无菌纯化水溶解。
  含有Met, CgsTry残基的多肽溶液由于氧化,寿命有限。应溶于无氧溶剂, 为防止重复冻融的破坏, 建议溶解过量的肽的便实验,其余多肽以固体形成保存。

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