BD biocoat 基质胶和细胞检测系统

产品货号：354230  354234  356230  356231  356234  356235  356237      

储存和运输：-20℃储存，干冰运输。

操作指南：

BD采用技术，从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中分离出BD Matrigel 基底膜基质，其主要成分由层粘连蛋白，IV型胶原，巢蛋白，硫酸肝素糖蛋白等组成，还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。BD Matrigel 基底膜基质在室温条件下，聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，以及对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达的研究。

BD Matrigel 基底膜基质形成的三维培养机制，可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时，Matrigel 还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达，支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化，高浓度的Matrigel 适用于研究体内血管生成和肿瘤细胞迁移及肿瘤模型的建立等。

Matrigel 基质会有色差变化（淡黄色到深红色），是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的。但是与5%CO2平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境中进行。试剂瓶瓶盖可用70%乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。细胞可在0.5mm厚度的Matrigel基质层表面生长，也可在1mm厚度的Matrigel三维基质内生长。过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层，也可以用于细胞贴壁，但不能用于细胞的分化研究。

注意：

1.可将冻融后的Matrigel分装在多个小管，所有分装均需用预冷的冻存管，迅速冷冻并保存，避免多次冻融。

2.Matrigel在22-35℃温度环境下快速成胶，因此溶解时在4℃冰上过一夜冻融（4℃时会随着温度的上升部分成胶）。所有用品在使用前需置于冰浴，必须使用预冷的移液管、吸头及小管操作Matrigel。成胶后的Matrigel可以在4℃24-48小时后重新呈液态。

推荐包被与成胶方法：

注意：为了保证Matrigel基质膜的成胶性能与稳定性，稀释浓度不应低于1:3，可用无血清培养基稀释，Matrigel成胶后立即使用。

薄胶成胶方法：

冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。

将需要使用的培养板置于冰上，加入浓度为50ul/cm2生长面积的Matrigel基质。

在37℃放置30分钟，即可使用。

厚胶成胶方法：

冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。将需要使用的培养板置于冰浴，将培养的细胞与Matrigel基质混合，用移液枪头使其悬浮于基质中。加入浓度为150-200ul/cm2生长面积的Matrigel基质。在37℃放置30分钟，可成胶。可以加入细胞培养的基质，可以是细胞直接生长在胶表面。

薄层包被方法：

冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。根据使用需要，采用无血清培养基稀释Matrigel基质，根据实验需要确定*包被浓度。将稀释的Matrigel基质包被于所需的培养器皿中，包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育1小时。去除未结合的Matrigel，用无血清培养基轻轻地冲洗。用BD细胞回收剂（354253）或离散酶（354235）可降解Matrigel基质，冰浴7小时候回收得到细胞。