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士锋生物质壁分离法测定植物细胞的渗透势

来源:上海士锋生物科技有限公司   2014年03月03日 08:11  

将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中,经过一段时间,植物细胞与蔗糖溶液间将达到渗透平衡状态。如果在某一溶液中细胞脱水达到平衡时刚好处于临界质壁分离状态,则细胞的压力势ψp下降为零。此时细胞液的渗透势ψs等于外液的渗透势ψs0,即ψs=ψs0,此溶液称为该组织的等渗溶液,其浓度称为该组织的等渗浓度,因此,只要测出植物组织的等渗浓度,即可计算出细胞液的渗透势ψs。实际测定时,由于临界质壁分离状态难以在显微镜下直接观察到,故一般均以初始质壁分离作为判断等渗浓度的标准。处于初始质壁分离状态的细胞体积,比吸水饱和时略小,故细胞液浓缩而渗透势略低于吸水饱和时的渗透势,此种状态下的渗透势称基态渗透势。
【仪器与用具】
显微镜1台;载玻片与盖玻片各若干;温度计1支;尖头镊子1把;刀片1片;小培养皿(直径6cm)9套;试剂瓶若干;烧杯、容量瓶、量筒、吸管等;吸水纸适量。
【试剂】
1mol/kg H2O蔗糖溶液 称取预先在60~80℃下烘干的蔗糖34.2g溶于100g蒸馏水中,即为1质量摩尔浓度蔗糖溶液。
蔗糖系列标准液 取干燥洁净的小试剂瓶9支编号,用1mol/kg H2O蔗糖溶液依C1V1=C2V2公式配制0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70mol/kg H2O等一系列不同浓度的蔗糖溶液(具体范围可根据材料不同而加以调整),贮于试剂瓶中,瓶口加塞以防蒸发浓缩。
0.03%中性红溶液。
【方法】
1.选大葱或洋葱鳞茎内表皮、小麦叶片等作实验材料。
2.取干燥洁净的培养皿9套编号,将配制好的不同浓度蔗糖溶液按顺序加入各培养皿中使成一薄层,盖好培养皿盖备用。
3.用镊子剥取供试材料下表皮或用刀片小心刮取小麦叶片上表皮(参考实验1),大小以0.5cm2为宜。吸去切片表面水分,立即浸入不同浓度的蔗糖溶液中,每一浓度4~5片。
为便于观察,可先将切片于0.03%中性红内染色5min左右,吸去水分,再浸入蔗糖溶液中,但如不加染色即能区别质壁分离时,仍以不染色为宜。

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