人早期分泌抗原靶6（ESAT-6）酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：                                                          96T

2pg/ml-48pg/ml

使用目的：

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中早期分泌抗原靶6（ESAT-6）含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人早期分泌抗原靶6（ESAT-6）水平。用纯化的人早期分泌抗原靶6（ESAT-6）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入早期分泌抗原靶6（ESAT-6），再与HRP标记的早期分泌抗原靶6（ESAT-6）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的早期分泌抗原靶6（ESAT-6）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人早期分泌抗原靶6（ESAT-6）浓度。

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1瓶

7

终止液

6ml×1瓶

2

酶标试剂

6ml×1瓶

8

标准品（96pg/ml）

0.5ml×1瓶

3

酶标包被板

12孔×8条

9

标准品稀释液

1.5ml×1瓶

4

样品稀释液

6ml×1瓶

10

说明书

1份

5

显色剂A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2张

6

显色剂B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

48pg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

24pg/ml

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

12pg/ml

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

6pg/ml

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

3pg/ml

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
温育：操作同3。
洗涤：操作同5。
显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结：

计算

  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月

小鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒 
小鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒
小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒
小鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒 
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小鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒
小鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒
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小鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒
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小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒
小鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒 
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小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒
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小鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒
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小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒
小鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒
小鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒
小鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒
小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒
小鼠补体片断(C)ELISA试剂盒
小鼠补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒
小鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒
小鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒
小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒
小鼠雌三醇(E3)ELISA试剂盒
小鼠雄烯二酮(ASD)ELISA试剂盒
小鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒
小鼠睾酮(T)ELISA试剂盒
小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 
小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒
小鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒
小鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒
小鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒
小鼠雌二醇(E2)ELISA试剂盒
小鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒
小鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒
小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒
小鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒
小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒
小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒
小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒
小鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒
小鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒
小鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒
小鼠白介素23(IL-23)ELISA试剂盒
小鼠心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒
小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA试剂盒
小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒
小鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒
小鼠凝血因子Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)ELISA试剂盒
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA试剂盒
小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA试剂盒
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA试剂盒
小鼠前心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒
小鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒
小鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒
小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒
小鼠抗凝血酶受体(ATR)ELISA试剂盒
小鼠凝血酶受体(TR)ELISA试剂盒
小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒
小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒
小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒
小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒
小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒
小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒
小鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒
小鼠骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒
小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒
小鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒
小鼠吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒
小鼠骨桥素(OPN)ELISA试剂盒
小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒
小鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒
小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒
小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒
小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒
小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒
小鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒
小鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒
小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒
小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒
小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒
小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒
小鼠P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒
小鼠P物质(SP)ELISA试剂盒
小鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒
小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒
小鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA试剂盒
小鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒
小鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒
小鼠抗IgE受体抗体ELISA试剂盒
小鼠抗IVIgG抗体ELISA试剂盒
小鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒
小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒
小鼠p53(p53)ELISA试剂盒
小鼠环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒
小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒
小鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒
小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒
小鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒
小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒
小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒
小鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒
小鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒
小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)ELISA试剂盒
小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒
小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒
小鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒
小鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA试剂盒
小鼠雌激素(E)ELISA试剂盒
小鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒
小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒
小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒
小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒
小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒
小鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒
小鼠卵巢癌标志物CA125ELISA试剂盒
小鼠乳腺癌标志物-CA153ELISA试剂盒
小鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒
小鼠血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA试剂盒
小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒
小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒
小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒
小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA试剂盒
小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA试剂盒
小鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒
小鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒
小鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒
小鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒
小鼠脱氢表雄酮(DHEA)ELISA试剂盒
小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒
小鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒
小鼠碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒
小鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒
小鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒
小鼠生长抑素(SS)ELISA试剂盒
小鼠血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒
小鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α)ELISA试剂盒
小鼠肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒
小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA试剂盒
小鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒
小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒
小鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒
小鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒
小鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒
小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒
小鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒
小鼠血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒
小鼠促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒
小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒
小鼠促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒
小鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒
小鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒
小鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒
小鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒
小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒
小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒
小鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒
小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA试剂盒
小鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒
小鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒
小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒
小鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒
小鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒
小鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒
小鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒
小鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒
小鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒
小鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒
小鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ) ELISA试剂盒
小鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒
小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒
小鼠S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒
小鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒
小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒
小鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒
小鼠血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒
小鼠乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒
小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒
大鼠活化素A受体抗体(ACV-RAb)ELISA试剂盒
大鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒
大鼠血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒
大鼠可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒
大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒
大鼠甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)ELISA试剂盒 
大鼠白介素7(IL-7)ELISA试剂盒
大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA试剂盒