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单克隆抗体的特性

来源:上海继锦化学科技有限公司   2010年04月09日 18:07  
单克隆抗体的特性
 
    单克隆抗体的问世,是生物技术领域划时代的飞跃,促进相关学科的迅速发展与传统的多克隆抗体相比有*的优势,但也存在一些不足之处。
 
    (一)单克隆抗体的特性
    1.高度特异性  单克隆抗体只针对一个表位,一个表位一般只有4一7个氨基酸,故单克隆抗体发生交叉反应的机会很少,即高度特异性。但这种专一性也不是的。在相似的抗原之间,其特异性具有浓度依赖性,即当抗体的浓度达到一定的程度后,其特异性可有所降低。单克隆抗体用于免疫酶染色、免疫荧光分析、放射免疫分析以及酶联免疫吸附分析时,其反应强度不如多克隆抗体,但其特异性优于多克隆抗体。此外,应用单克隆抗体时对抗原的保存要求也更加严格。例如,某些固定方法可使抗原的特定表位失去抗原性而产生阴性结果。
    2.高度的均一性和可重复性  单克隆抗体是由单个细胞株产生的均一性抗体。只要长期保持杂交瘤细胞的稳定性,不发生突变,就可以长期获得同质的单克隆抗体,单克隆抗体仅具有单一的生物功能。
    3.弱凝集反应和不呈现沉淀反应  单克隆抗体与抗原反应(除非抗原上有较多的同一表位)不呈现沉淀反应,这是因为抗单一抗原决定簇表位的单克隆抗体不易形成三维晶格结构之故。由于单克隆抗体对细胞的凝集作用较多克隆抗体弱,所以单克隆抗体的细胞毒作用也较弱。其细胞毒作用不仅取决于单克隆抗体的种类,而且取决于抗原决定簇在细胞表面的分布。两种或两种以上的单克隆抗体可使细胞表面的抗原表位集中,并使其细胞毒的作用加强。
    4.对环境敏感性  单克隆抗体易受环境的pH、温度和盐类浓度的影响,使其活性降低甚至丧失,但单克隆抗体遇热后的聚合作用很低。已证明56~C、5min可使单克隆抗体失活,小鼠血清可能有一定的保护作用,两种单克隆抗体的混合物也可使其耐热性加强。总之,单克隆抗体越纯对温度越敏感,而杂蛋白及其他抗体分子可使单克隆抗体的耐热性增强。单克隆抗体受pH的影响较多克隆抗体明显,其*的pH为6~8,而且抗体越纯对pH越敏感。低浓度的NaCl对单克隆抗体可能有一定的保护作用。
 
    (二)单克隆抗体的优点与局限性
    单克隆抗体和多克隆抗体各有其优点和局限性,只有对它们有全面的了解,才能根据不同应用领域的要求,正确地选择和应用。
    1.单克隆抗体的优点
    (1)杂交瘤可以在体外“*”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。
    (2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。
    (3)由于可能得到“无*”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等。
    (4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。
    2.单克隆抗体的局限性
    (1)单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。
    (2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。
    (3)制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高。

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