恒奥德仪器新品薄层色谱系统 薄层色谱扫描仪操作步骤
薄层色谱法(TLC)是一种利用各组分在固定相和移动相之间吸附能力差异进行分离的色谱技术,其核心原理基于物质在两相中的分配系数不同。
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基本原理
薄层色谱通过吸附剂(如硅胶)作为固定相,样品溶液点在薄层板上后,展开剂(流动相)沿板流动。各组分因吸附能力不同,在固定相上的停留时间不同,从而按不同距离移动。例如,吸附力强的组分移动慢,吸附力弱的组分移动快,最终实现分离。
操作步骤
点样:将样品溶液用毛细管点在薄层板一端,通常基线距底边0.5~1.0厘米,点样直径1-2毫米,点间距离0.5~1.0厘米。
展开:加入展开剂(如石油醚/乙酸乙酯混合液),利用毛细管作用沿板流动。展开过程中需控制环境温湿度,避免边缘效应影响分离效果。
检测:根据组分显色特性观察斑点位置,常用方法包括直接观察颜色、紫外灯下观察荧光或喷显色剂。
关键参数
Rf值:组分移动距离与展开剂前沿距离的比值,用于定性分析,理想范围为0.15~0.85。
显色方法:根据化合物性质选择碘显色、紫外检测或特定试剂显色。
该方法具有操作简便、成本低、样品量少等优点,但分离效率较低,适用于小分子极性物质的初步分析。
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