蛋白酶K的作用与功能

蛋白酶K/Proteinase K

蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中纯化得到。蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定，还具有降解天然蛋白质的能力。

产品：蛋白酶K

含量：≥20mg/ml 【24mg/ml】

纯度：≥95% SDS-PAGE

活性：≥30U/mg 【42U/mg】

DNase：未检出

RNase：未检出

CAS号：39450-01-6

类型：非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶

分子量：28,900道尔顿（28.9kDa）

物理和化学性质

溶液颜色：无色透明，如出现沉淀则不能再使用

稳定性：在尿素和SDS中稳定，EDTA等螯合剂或SDS等去垢剂均不能使之失活

活性范围：在较广的pH范围（4～12.5）内及高温（50～70°C）均有活性

作用与功能

DNA提取：蛋白酶K在DNA提取中的主要作用是酶解与核酸结合的组蛋白，使DNA游离在溶液中，随后用不同方法进行抽提，除去杂质，收集DNA。

RNA提取：在RNA提取过程中，蛋白酶K可以抑制RNA酶的活性，降低RNA酶对RNA的降解作用。

原位杂交技术：用于杂交前的处理，具有消化包围靶DNA蛋白质的作用，以增加探针与靶核酸结合的机会，提高杂交信号。但需注意浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时，会对细胞结构造成破坏。

病毒灭活：蛋白酶K因其蛋白水解能力可以破坏病毒表面的蛋白，具有作为病毒灭活消毒剂的潜力。

工业应用：在皮革、毛皮、丝绸、医药、食品、酿造等方面有广泛应用，如皮革工业的脱毛和软化、蚕丝脱胶、肉类嫩化等。

应用注意事项

在使用蛋白酶K时，应注意控制其浓度和处理时间，以避免对细胞结构造成不必要的破坏。

蛋白酶K具有自我酶解特性，在无保护剂时很难长期稳定保存，因此在制备和储存过程中需要特别注意。