液相色谱柱是液体色谱分析仪的核心组件,由柱管、筛板、接头等部件构成,主要分为分析型、制备型和保护柱三类。分析型色谱柱根据内径差异分为常规分析柱(4.0-4.6mm)、窄径柱(1.0-2.1mm)及毛细管柱(0.2-0.5mm),制备型则涵盖半制备柱(5-10mm)和制备柱(21.2-50mm)。
填料基质:
1.硅胶基质-pH 2-8-高或低pH下,硅胶会溶解。
2.Al2O3·nH2O-pH1-14-化学修饰困难。
3.聚合物基质-pH1-14-孔结构复杂,孔径不均匀导致柱效不够高,有机溶剂可能导致聚合。物基质溶涨而受损
在选择色谱柱之前,先多了解自己的样品和杂质,他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。
1.若样品是碱性的;可选择高纯硅胶柱(高纯硅胶缺少金属杂质,且硅胶端基封尾)或一些经过修饰的C18柱(如极性嵌入技术或碱去活技术等),他们都会减少碱性化合物的拖尾,一般会选择中性或偏碱的条件下做,因为这样可增加碱性样品的保留。
2.样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测,即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。
3.如果样品极性太强或酸性太强;可以选择CN,NH2,或硅胶柱,HILIC(亲水色谱),也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱(缺点是离子对试剂平衡时间长,对流动相pH要求比较精密,否则很难重复实验,另外离子对试剂很难洗下来,基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它实验)。
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