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前 言
基质胶是3D细胞培养、类器官、成瘤、侵袭、血管生成等实验的“万能支架”。然而，从解冻到铺板，从浓度选择到结果判读，稍不留神就可能“翻车”。翌圣生物结合上万次实验反馈，整理出这份“避坑指南”，助你一次上手，稳拿高分数据。
到货 & 储存
问题 | 翌圣建议 |
收到货后如何保存？ | 将本产品置于-20℃环境存放；若短暂放置，4 ℃不超过7天。 |
能否反复冻融？ | 不建议反复冻融；融化后立即分装（200 µL/管），-20 ℃保存。 |
如何进行融化？ | 冷冻状态的基质胶可以在操作前一天埋藏于碎冰中，再转移入4 ℃冰箱，次日即可使用。适当延长4℃融化时间可以有效减少基质胶中的气泡。 |
颜色/浓度怎么选？
类型 | 特点 | 适用场景 |
含酚红 | pH指示 | 常规实验都可以使用含酚红产品，由于酚红存在时，在温度、pH不同的情况下液体会出现颜色的差异，颜色可以在明黄色至暗红色之间变化。 |
无酚红 | 无颜色干扰 | 涉及颜色检测的实验，推荐使用不含酚红的基质胶，如对子宫内膜细胞培养必须使用不含酚红的基质胶。此外，酚红是一种潜在的内分泌干扰物，有可能会干扰实验动物体内激素的自然产生和代谢能力。 |
标准浓度 | 蛋白浓度：8 - 12 mg/mL | Transwell实验、皮下成瘤实验 |
高浓度 | 蛋白浓度：18 - 22 mg/mL，凝胶3-5 min | 皮下成瘤中较难成瘤的细胞系 |
低生长因子 | 标准浓度基质胶的基础上做了减生长因子处理 | 类器官培养、血管生成 |
实验细节
场景 | 高频问题 | 解决锦囊 |
皮下成瘤 | 荷瘤不成功可能的原因 | 取处于对数生长期的细胞，细胞达 80 - 90% 左右密度为宜 |
选择 4 - 6 周龄裸鼠，小于 4 周可能不耐受过早死亡，大于 6 周免疫力会增强，不易成瘤。 | ||
可能是小鼠免疫排斥，建议更换免疫缺陷程度更大的小鼠 | ||
可以在接种后一周补种1次，可以很好的提高成功率 | ||
肿瘤长起来后又消失的原因 | 很可能是由于炎症反应，肿瘤细胞被小鼠自身吸收造成的。若后续肿瘤依旧未长出来，可考虑更换免疫缺陷程度更大的小鼠。 | |
血管生成 | 成管实验中细胞 不能形成连续的网格 | 建议使用3-5代状态较好且融合度70%-80%的HUVEC细胞 |
细胞数量过少会使细胞无法形成连续的网络 | ||
4 - 18 h可见血管生成。建议每4个小时观察一次。 | ||
侵袭实验 | 细胞不转移 | 细胞侵袭转移能力比较弱 |
细胞的活性太差，活性不好的细胞做侵袭实验难度较大 | ||
用胰酶消化后，必须将含血清的培养基洗去 | ||
类器官实验 | 类器官传代的标准 | 不同类器官时间不同，通常7-14日、直径100-200um左右可以传代，有些发育慢的可能要数周才能发育到适合传代状态。 |
鉴定类器官的方法 | 最基础的通过显微镜和H&E染色观察类器官形态；进一步可以用免疫荧光检测该类器官是否表达相应的biomarker； | |
为什么观察到的形态却和文献不一致？ | 决定类器官形态的因素有很多，样本来源是否相同、选用的细胞因子品质是否有差异都有可能改变最终的类器官形态。 |
产品详情
产品名称 | 货号 | 规格 |
Ceturegel® Matrix LDEV-Free基质胶 | 40183ES | 1.5 mL/5 mL/10 mL |
Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 | 40184ES | 1.5 mL/5 mL/10 mL |
Ceturegel® Matrix GFR，LDEV-Free 基质胶 | 40185ES | 1.5 mL/5 mL/10 mL |
Ceturegel® Matrix GFR，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 | 40186ES | 1.5 mL/5 mL/10 mL |
Ceturegel® Matrix High Concentration，LDEV-Free 基质胶 | 40187ES | 1.5 mL/5 mL/10 mL |
Ceturegel® Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 | 40188ES | 1.5 mL/5 mL/10 mL |
Ceturegel® Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free 基质胶 | 40189ES | 1.5 mL/5 mL/10 mL |
Ceturegel® Matrix hESC-Qualified，LDEV-Free 基质胶 | 40190ES | 1.5 mL/5 mL/10 mL |
Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶 | 40191ES | 1.5 mL/5 mL/10 mL |
Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free Plus基质胶 | 40192ES | 1.5 mL/5 mL/10 mL |
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