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小鼠全血分离血清的详细步骤及要点

来源:汇智和源生物技术(苏州)有限公司   2025年07月24日 16:50  
  在生物医学实验研究中,常常需要从小鼠全血中分离出血清,以便进行后续的各种检测分析,以下是其具体操作步骤。
  首先,要准备好相应的实验材料和器材,包括干净的离心管、采血器具(如毛细玻璃管或一次性采血针等)、酒精棉球、低温冰箱以及合适的离心机等。采血前,需对小鼠进行适当的固定,以保证采血过程顺利进行且能采集到足量的血液。一般可采用专业的小鼠固定器,将小鼠以舒适的体位固定好,露出尾部等适合采血的部位。
  采血时,常用眼眶静脉丛采血法或者尾静脉采血法。以眼眶静脉丛采血为例,先用酒精棉球擦拭小鼠眼部周围进行消毒,然后手持采血器具,轻轻压迫小鼠眼球使其充血,随后迅速且精准地刺入眼眶静脉丛,让血液顺势流入预先准备好的干净离心管中。采血过程中要注意动作的轻柔,避免过度伤害小鼠,同时尽量保证血液采集的顺畅,防止出现凝血等情况影响后续分离效果。
 

小鼠全血

 

  采集到一定量的小鼠全血后,接下来就是关键的血清分离步骤。将装有全血的离心管放置在室温下静置一段时间,通常大约30分钟到1小时左右,目的是让血液中的凝血因子充分发挥作用,促使血液凝固,形成血凝块,在此过程中要避免晃动离心管。待血液全凝固后,把离心管放入离心机中,设置合适的离心转速和时间,一般来说,转速可设置为3000-5000转/分钟,时间控制在5-10分钟左右。通过离心,血凝块会收缩并沉淀在离心管的底部,而上层清澈的液体就是所需要的血清了。
  离心结束后,小心取出离心管,用移液枪或者微量吸液管缓慢地吸取上层的血清,转移到新的干净离心管中,注意不要吸到底部的血凝块,以免造成血清污染。吸取完成后,可将含有血清的离心管做好标记,比如注明小鼠编号、采血日期等信息,然后根据实验要求,将血清放置在合适的温度下保存,通常短期可置于4℃冰箱,长期则需放在-80℃冰箱冻存,以便后续进行如酶联免疫吸附测定、生化指标检测等各种实验分析。
  总之,小鼠全血分离血清的过程虽然看似不难,但每一个步骤都需要严谨操作,从采血到静置、离心再到血清的吸取和保存,任何一个环节出现问题都可能导致血清质量不佳,影响后续实验结果的准确性,所以实验人员务必严格遵循相关步骤和要求,确保获取高质量的小鼠血清。
 

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