了解姬姆萨染料

 姬姆萨染色简称姬氏染色，是用天青色素、伊红、次甲蓝混合而成的姬姆萨染料对血液涂抹标本、血球、疟原虫、立克次体以及骨髓细胞、脊髓细胞等标本进行染色的染色方法。染前用蛋白酶等进行处理，然后再用姬姆萨染液染色，在染色体上，可以出现不同浓淡的横纹样着色。姬姆萨染液可将细胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色，在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。

用途： 可用于制作血液涂片检查寄生性原生动物，如疟原虫、锥虫(trypanosomes)。

敏感性： 对湿度敏感。

推荐使用方法

1. 姬姆萨染色液原液配制

配方：0.5g 姬姆萨粉末，33 ml 甘油；33ml 甲醇；

配制过程：1）取0.5g姬姆萨染料粉末加入33ml甘油，混匀。让其保持在55-60°C并搅拌促使溶解2h；2）然后加入33ml甲醇，充分摇匀，并将其置于55-60°C温箱中并搅拌24h促使充分溶解。3）Whatman #1号滤纸过滤除去沉淀物，此时即得到姬姆萨染色液原液，装于棕色小口试剂瓶内，室温长期保存。

2. 血液涂片染色方法

注意：染色工作液需要现配现用。染色工作液的用量需要根据具体实验来调整，以得到最佳染色结果为准。

1) 按照常规方法制备血涂片，待血膜干燥后，用甲醇固定2min；

2) 根据血液涂片样本的数量，以及染色工作液的浓度制备足量的染色工作液。比如取约0.67ml的姬姆萨原液加入30ml姬姆萨稀释液配成约2%的姬姆萨工作液，装于染色液缸中。

注意：也可通过提高染色液的工作浓度以缩短染色时间，如10%姬姆萨工作液对血液涂片染色10min。高浓度染色工作液虽然能缩短染色时间，但可能会达不到预期结果。

3)  将血玻片置于上述染色液中室温染色40~60min，或者直到出现理想的结果。

4) 取出血涂片，用蒸馏水（或PBS buffer，pH 6.8）冲洗3~4次。厚涂片需要置于缓冲液中浸泡5min，使得充分冲洗。

5) 正面朝上置于染色架上使其晾干，之后做镜检。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。