解析RIPA裂解液配方及其蛋白提取应用-赛默飞

Thermo Scientific RIPA 裂解和提取缓冲液是一种用于培养的哺乳动物细胞的常用细胞裂解试剂的高质量、即用型且披露的配方。

RIPA 裂解缓冲液的特点：

•便利— 即用型解决方案；无需自行装配和制备组成部分

•灵活— 可与许多应用兼容，包括报告基因检测、蛋白检测、免疫检测和蛋白纯化

•通用— 可提取细胞质、细胞膜和细胞核蛋白

•披露的配方— 不含专有组成部分，用户可全面控制和了解可能存在的兼容性问题

该 RIPA 缓冲液可从培养的哺乳动物细胞（包括铺板细胞和团状悬浮细胞）中高效裂解并提取蛋白。该常用试剂可提取细胞膜、细胞核和细胞质蛋白，并可与许多应用兼容，包括报告基因检测、Thermo Scientific BCA 蛋白检测、免疫检测和蛋白纯化。Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂混合物（产品编号 78430）和 Halt 磷酸酶抑制剂混合物（产品编号 78420）等抑制剂也可与该 RIPA 缓冲液配方兼容，可在使用前添加以防止蛋白水解并保持蛋白磷酸化。

RIPA 缓冲液的名称来源于为其开发这种缓冲液的原始应用：放射免疫沉淀测定。尽管目前在实验室中很少使用这种同位素检测方法，但该裂解缓冲液配方的首字母缩略词已被广泛使用。RIPA 细胞裂解试剂可从各种细胞类型中高效提取蛋白，因为其含有三种非离子型和离子型去污剂。该去污剂配方的一大劣势是，与其他裂解试剂相比，其与某些下游应用相对不兼容。

RIPA 裂解和提取缓冲液规格

相关产品

1、Pierce™ IP 裂解缓冲液

Thermo Scientific Pierce IP 裂解缓冲液针对细胞裂解物的产量、纯度以及与免疫沉淀（IP 和 Co-IP）（作为与细胞裂解物相关的下游应用）的兼容性进行了优化。

IP 裂解缓冲液的特点：

•经过优化，可与各种免疫沉淀和牵出测定兼容

• 与各种蛋白测定、报告基因测定和免疫检测程序兼容

• 现成的配方，可有效提取细胞质、细胞膜和细胞核蛋白

• 温和的配方可帮助保持蛋白复合物用于免疫共沉淀

• 不会释放可导致样品高粘性的基因组 DNA

IP 裂解缓冲液是一种基于改良 RIPA 缓冲液配方（不含 SDS）的哺乳动物全细胞裂解试剂。这种中等强度裂解缓冲液可高效溶解细胞蛋白，但不会像一般 RIPA 缓冲液那样释放染色体组 DNA 或破坏蛋白复合物。Pierce IP 裂解缓冲液经过特殊配方，可用于各种牵出测定和免疫沉淀检测。

Pierce IP 裂解缓冲液可从孔板细胞和经悬浮培养液粒化的细胞中有效裂解出培养的哺乳动物细胞。该裂解缓冲液经过优化可用于各种牵出测定和免疫沉淀检测，还可与很多其他应用兼容，包括 Thermo Scientific Pierce BCA 和 660 nm 蛋白测定、蛋白纯化和各种免疫检测（如 ELISA、Western 印迹）。

Pierce IP 裂解缓冲液由 25 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1% NP-40 和 5% 甘油组成。该缓冲液不含蛋白酶或磷酸酶抑制剂；但是如果需要，可在使用前添加各种抑制剂，如 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂混合物或磷酸酶抑制剂混合物，以防止蛋白水解并保持蛋白磷酸化。

2、M-PER™ 哺乳动物蛋白提取试剂

Thermo Scientific M-PER哺乳动物蛋白质抽提试剂用于从培养的哺乳动物细胞中高效抽提总可溶性蛋白。

M-PER哺乳动物蛋白抽提试剂的特点：

• 作用温和— 温和的除垢剂裂解，产生的抽提物直接与考马斯(Bradford)和BCA蛋白定量分析试剂或SDS-PAGE兼容

• 兼容性强— 抽提的可溶性蛋白处于非变性状态，可直接用于免疫沉淀反应和其他亲和纯化过程

• 不含胺基并且可透析— 确保其与随后的分析系统兼容

• 方便— 贴壁细胞直接在板上裂解或者在剥离和洗涤后悬浮于溶液中

• 非变性— 维持荧光素酶、β-半乳糖苷酶、CAT和其他报告基因的活性，与其他供应商的产品和冷冻/解冻方法一样好或更出色

这款完整的细胞裂解试剂是一种非变性除垢剂配方，可在短短5分钟内溶解细胞膜并抽提总可溶性细胞蛋白。M-PER试剂很少或根本不需要机械破碎，并且相比冷冻/解冻循环方法和超声波破碎方法可以获得更多的蛋白。这种哺乳动物细胞裂解试剂是如此有效，不需要从培养皿上剥离贴壁细胞，可以简单而直接地在生长细胞的24孔和96孔板上进行裂解和分析。最终无论是贴壁细胞还是悬浮细胞的裂解产物与很多下游分析都兼容，包括免疫分析、酶分析和各种常见的报告基因分析。

在任何蛋白质组学分析过程中，蛋白质抽提通常都是关键的第一步，首先细胞必须裂解，以便打开细胞并释放出感兴趣的蛋白质。常用的几种物理裂解细胞方法包括机械破坏、液体均质化、超声波裂解、冷冻/解冻循环和手工研磨。

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