凝胶色谱仪日常维护：色谱柱再生、泵密封更换与基线校准

来源：上海杜凯生物科技有限公司 2025年07月10日 11:32

　　一、色谱柱再生：恢复分离效能的关键步骤

　　凝胶色谱柱长期使用后，可能因样品残留或微生物污染导致柱效下降。再生流程需根据污染物类型选择方法：

　　有机物污染：用纯甲醇或乙腈以0.5mL/min流速冲洗2-4小时，置换凝胶孔隙中的疏水杂质。

　　盐沉积或蛋白质污染：采用阶梯式冲洗法，先用50%乙腈+0.1%TFA）冲洗1小时，再换用0.1MNaOH溶液冲洗2小时（需确认色谱柱耐受pH），最后用纯水平衡至中性。

　　再生后验证：注射标准样品（如聚乙二醇或蓝葡聚糖），对比再生前后保留时间与峰形，若理论塔板数恢复至初始值的80%以上，则再生成功。

　　二、泵密封更换：保障流速稳定的核心操作

　　泵密封磨损会导致漏液或压力波动，需定期更换：

　　更换时机：若发现泵头有液体渗出、压力不稳定或流速误差超过±2%，需立即更换密封圈。

　　操作步骤：关闭仪器电源，排空系统压力；拆卸泵头，取出旧密封圈（注意方向）；用异丙醇清洁密封槽，安装新密封圈并涂抹硅脂润滑；重新组装后，用纯水以0.1mL/min流速排气泡，逐步升至目标流速。

　　注意事项：避免使用尖锐工具触碰密封圈，防止划伤；更换后需运行至少30分钟，观察压力是否稳定。

　　三、基线校准：确保数据准确性的基础

　　基线漂移或噪声过高会影响定量结果，需定期校准：

　　校准前准备：用纯流动相冲洗系统至基线稳定（通常需2-4小时），确保检测器池温度与柱温一致。

　　校准方法：进入仪器软件“基线校准”模块，采集空白溶剂信号，自动扣除背景噪声；若手动校准，需记录基线偏移值，在数据分析时修正。

　　维护建议：每月检查一次基线稳定性，若噪声＞0.5mAU（UV检测器）或漂移＞0.1mAU/min，需清洗检测器流通池或更换氘灯。

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