试用 | SP6 VS T7 RNA聚合酶怎么选？一文解析高特异性转录秘诀

在生命科学研究领域，体外转录技术正以蓬勃之势快速发展，成为众多科研项目及生物制药研发的关键技术支撑。在体外转录的复杂体系中，RNA聚合酶堪称核心“主角”，其以DNA为模板催化合成互补RNA分子的功能至关重要。T7、T3与SP6 RNA聚合酶均为常用工具酶，其中T7 RNA聚合酶因具备高效的转录产能优势，被广泛应用于各类体外转录场景。而SP6 RNA聚合酶由于高度SP6启动子序列识别特异性，在精准转录方面展现出优势，其与T7 RNA聚合酶形成功能互补，共同为不同科研需求提供差异化解决方案。

图1. SP6 RNA Polymerase体外转录流程图^[1]

SP6 RNA聚合酶是一种DNA依赖型的5'→3' RNA聚合酶，它能够高度特异性地识别SP6启动子序列，仅以SP6启动子下游的DNA为模板，高效催化单链或双链DNA SP6启动子下游NTP（核苷酸三磷酸）的掺入，从而合成与模板DNA互补的RNA链。不仅如此，它还能兼容如生物素标记、荧光素标记等修饰的NTP，为多样化标记RNA的合成提供了可能。凭借自身的特性，SP6 RNA聚合酶在科研与生物技术领域大显身手，广泛应用于以下场景：

翌圣SP6 RNA Polymerase (Cat#14810)

图2. 翌圣SP6 RNA Polymerase与进口品牌同类产品SP6 RNA Polymerase以带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行体外转录时的效果图

注：分别添加不同酶活SP6 RNA Polymerase与0.1 μg带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行体外转录，37℃孵育2h，70℃孵育10min终止反应，加入2U DNase I (10325ES)，37℃孵育15min消化模板DNA，得到的RNA转录产物为248 nt。取出10 μL反应产物，加入5μL 2 × RNA Loading Buffer，70℃变性10min，然后进行1%琼脂糖凝胶电泳，用1X TAE作为电泳液，160V电泳20min，染色后拍照观察结果。

图3. 翌圣SP6 RNA Polymerase核酸外切酶、切口酶、非特异性核酸酶、RNase残留检测结果

注：将SP6 RNA Polymerase分别与核酸底物孵育，并通过琼脂糖凝胶电泳分析谱带变化。实验结果表明，翌圣的3个批次SP6 RNA Polymerase均未检测出核酸外切酶（100 U）、切口酶（100 U）、非特异性核酸酶（100 U）或RNase（20U）残留，为您的实验结果准确性与可靠性保驾护航。