薄层色谱点样仪是一种常用的分离和分析技术,而点样是影响实验结果的关键步骤之一。如果点样不均匀,可能导致斑点扩散、拖尾或分离效果差,影响分析准确性。本手册将详细介绍薄层色谱点样仪点样不均匀的可能原因及解决方法,帮助实验人员快速排查故障。
1.点样不均匀的常见表现
-斑点大小不一
-点样位置偏移
-斑点扩散或拖尾
-点样量不一致
2.可能原因及解决方案
(1)点样针或毛细管堵塞
现象:点样液滴不出或出液不稳定。
原因:
-样品溶液含有颗粒或杂质
-点样针/毛细管未清洁干净
-溶剂挥发导致针尖堵塞
解决方法:
-用适当溶剂(如甲醇、丙酮)清洗点样针
-使用0.22μm滤膜过滤样品溶液
-定期检查针头,必要时更换
(2)点样压力或速度不稳定
现象:点样量忽大忽小,斑点形状不规则。
原因:
-气压调节不当(自动点样仪)
-手动点样时力度不均
-点样仪泵或电磁阀故障
解决方法:
-检查气压是否稳定,调整至合适压力
-手动点样时保持匀速、垂直点样
-如为自动点样仪,检查泵和电磁阀是否正常工作
(3)点样高度不一致
现象:斑点大小不一,部分斑点扩散严重。
原因:
-点样针与薄层板距离不合适
-点样仪Z轴高度未校准
解决方法:
-调整点样针高度,使其轻触薄层板但不压弯
-使用校准工具检查点样仪Z轴位置
(4)薄层板表面问题
现象:点样后斑点扩散不均或吸附不良。
原因:
-薄层板受潮或污染
-固定相(如硅胶)不均匀
-点样前未活化薄层板
解决方法:
-使用前将薄层板在105°C活化30分钟
-检查薄层板是否均匀,避免使用破损板
-确保实验环境湿度适宜(可放置干燥剂)
(5)样品溶剂选择不当
现象:点样后斑点扩散过快或无法形成清晰斑点。
原因:
-溶剂极性过大,导致快速扩散
-溶剂挥发过快,导致点样不均匀
解决方法:
-选择合适极性的溶剂(如甲醇、乙酸乙酯等)
-可加入少量高沸点溶剂(如DMF)减缓挥发
(6)点样仪机械故障
现象:点样位置偏移或重复性差。
原因:
-点样仪导轨或传动装置磨损
-电机或步进驱动器故障
-软件控制参数错误
解决方法:
-检查导轨润滑情况,必要时清洁并涂抹润滑油
-校准电机步进参数
-重新设置点样程序,确保点样坐标正确
3.日常维护建议
1.定期清洁点样针:每次使用后用溶剂冲洗,避免残留堵塞。
2.校准仪器:每周检查点样高度、气压等参数。
3.优化点样条件:调整合适的溶剂、点样量和速度。
4.检查薄层板质量:确保无污染、无受潮。
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