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常温凝胶渗透色谱系统核心原理

来源:上海杜凯生物科技有限公司   2025年07月01日 18:53  
  常温凝胶渗透色谱系统(Gel Permeation Chromatography, GPC),也称为尺寸排阻色谱(Sie Exclusion Chromatography, SEC),是一种基于分子大小分离物质的液相色谱技术。
 
  1.核心原理:凝胶渗透色谱的分析是利用体积排除机理,色谱柱装填的是多孔性凝胶或微粒,这些凝胶颗粒具有三维网络结构,其孔径大小与待分离的高分子化合物分子尺寸相当。当样品溶液通过色谱柱时,较小的分子能够进入凝胶内部的孔隙,而较大的分子则只能沿着凝胶颗粒间的空隙流动。由于路径不同,较小分子在柱中的停留时间较长,而较大分子则较快地流出色谱柱,从而实现按分子大小进行分离。
 
  2.检测方法:在GPC分离过程中,选择合适的检测方法对于获得准确的结果至关重要。常见的检测方法包括光散射、粘度测量和折光率检测等。其中,光散射检测器可以用于检测溶液中分子的平均分子质量和聚合度,为分析提供重要数据支持。
 
  常温凝胶渗透色谱系统的使用注意事项:
 
  1.环境要求:常温凝胶渗透色谱系统需要放置在平稳、稳定、通风的地方,避免受潮或温度变化过大的环境。
 
  2.操作规范:操作人员应事先熟悉常温凝胶渗透色谱仪的使用说明,了解仪器的操作流程和注意事项。操作人员应按照仪器操作流程进行操作,禁止私自调整仪器参数或进行不规范操作。
 
  3.样品处理:样品必须溶解在所选的溶剂中,否则会影响分离效果和检测结果的准确性。对于难以溶解的样品,可以尝试加热、搅拌、超声等方法促进其溶解。样品中不能含有颗粒物或杂质,以免堵塞色谱柱和仪器的其他部件。在进样前,必须对样品进行过滤处理。
 
  4.色谱柱保护:根据样品的分子量范围选择合适的色谱柱,不同的柱具有不同的分离范围。定期清洗和再生色谱柱,以去除吸附的杂质和恢复柱效。避免柱干涸,因为这会损坏固定相并影响分离效果。
 
  5.流动相管理:选择与样品兼容且不会对检测器产生干扰的流动相。定期更换流动相和过滤器,防止流动相中的杂质和微生物滋生,堵塞色谱柱和仪器的其他部件。
常温凝胶渗透色谱系统

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