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无血清细胞冻存液可用于冻存人和各种动物细胞株

来源:赛尔瑞成(北京)生命科学技术有限公司   2025年06月23日 06:14  
  无血清细胞冻存液是一种专为细胞冻存设计的溶液,不含血清成分,适用于人和各种动物细胞株的冻存。以下是使用无血清细胞冻存液冻存细胞的具体方法:
  一、准备工作
  材料与工具:
  冻存液(需提前预冷至4℃)。
  细胞株(对数生长期,状态良好)。
  离心管、移液器、冻存管。
  程序降温盒或异丙醇冻存盒(可选)。
  -80℃冰箱或液氮罐(长期储存)。
  注意事项:
  所有操作需在无菌条件下进行,避免污染。
  冻存液需提前预冷,减少温度冲击对细胞的伤害。
  细胞冻存前需确保状态良好,避免冻存受损或老化的细胞。
  二、无血清细胞冻存液具体步骤
  1. 细胞收集
  将细胞从培养皿中消化下来,制成单细胞悬液。
  离心去除消化液,弃上清。
  2. 细胞计数
  使用血细胞计数板或自动化细胞计数仪,计算细胞密度。
  调整细胞浓度至适宜范围。
  3. 配制冻存液
  将细胞冻存液与细胞悬液按比例混合(通常为1:1或根据说明书调整)。
  例如:将1 mL细胞悬液与1 mL预冷的无血清冻存液混合,使细胞密度符合要求。
  4. 分装冻存管
  将混合好的细胞悬液分装至冻存管中,每管1~1.5 mL。
  拧紧冻存管盖,标记细胞名称、冻存日期等信息。
  5. 程序降温
  方法1:程序降温盒:
  将冻存管放入程序降温盒中,按照预设程序降温至-80℃。
  然后将冻存管转移至液氮罐中长期储存。
  方法2:异丙醇冻存盒:
  将冻存管放入异丙醇冻存盒中,直接放入-80℃冰箱,利用异丙醇缓慢释放热量实现程序降温。
  方法3:手动降温(应急):
  将冻存管先放入4℃冰箱30分钟,再转入-20℃冰箱1~2小时,最后转入-80℃冰箱过夜,次日转移至液氮罐。
  6. 无血清细胞冻存液长期储存
  将冻存管转移至液氮罐中,确保液氮覆盖冻存管顶部,避免细胞复温。
 

 

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