一、剪裁长度:精准把控的起始点
将透析袋裁剪至 10 - 20cm 的长度,这一规格设置有着明确考量。若长度不足,样品装载量受限,难以满足实验要求;而长度过长,不仅会拉长透析时液体扩散的路径,延长操作耗时,还容易出现折叠、缠绕等状况,影响透析效率。恰当的长度既能保证充足的样品处理量,也便于后续操作与固定。
二、首轮煮沸:多重净化的核心步骤
把透析袋置于 2%(w/v)碳酸氢钠与 1mmol/L EDTA2Na 混合溶液(pH = 8.0)中煮沸 10 分钟,此过程是杂质去除的关键环节。碳酸氢钠呈弱碱性,可与酸性杂质发生中和反应,有效去除部分酸性物质;同时,其水解产生的二氧化碳气泡在沸腾时冲击透析袋表面,辅助剥离杂质。EDTA2Na 作为强效金属离子螯合剂,能与透析袋残留的重金属离子紧密结合,形成稳定络合物,将重金属从透析袋上分离。二者相互配合,通过化学清洗与物理冲刷,实现对杂质的深度清除。
三、充分冲洗:规避二次污染的要点
用蒸馏水对透析袋进行多轮冲洗,是防止残留化学试剂污染样品的必要操作。若冲洗不充分,碳酸氢钠和 EDTA2Na 溶液残留可能与样品中的生物活性物质发生反应,改变样品性质。经过多轮冲洗,直至清洗液趋近中性,确保无化学残留,才能为后续实验营造纯净环境。
四、再次煮沸:强化净化效果
将冲洗后的透析袋放入 1mmol/L EDTA2Na 溶液(pH = 8.0)中再次煮沸 10 分钟,这是对前期处理的补充强化。首轮煮沸后,仍可能存在少量顽固杂质或未络合的重金属离子,再次煮沸借助 EDTA2Na 的持续作用,进一步降低杂质含量,保障透析袋的高纯度,为实验结果的准确性筑牢基础。
五、酒精浸泡与储存:长效防护机制
冷却后的透析袋浸泡于 30% 或 50% 的酒精溶液中,存放在 4℃冰箱内,该储存方式具备防腐与抑菌双重作用。酒精可使细菌蛋白质变性,抑制微生物生长,防止透析袋在储存期间受到污染;低温环境进一步减缓微生物的代谢与繁殖速度。确保透析袋始终浸没在酒精溶液中,取用过程佩戴手套,避免外界污染物接触,保证透析袋在使用前保持洁净状态。
六、使用前清洁:最后一道安全防线
即便完成上述处理与储存流程,使用前仍需用蒸馏水对透析袋进行细致清洁。这一步骤至关重要,能够清除储存过程中可能吸附的酒精或其他杂质,确保透析袋以洁净状态接触生物样品,排除潜在干扰因素对实验结果的影响。
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