泛素(Ub)是一种高度保守的8kDa多肽,存在于所有真核细胞中。它通过三种酶的顺序作用与目标蛋白的赖氨酸残基的ε-氨基结合,这三种酶分别是E1泛素激活酶、E2结合酶和E3连接酶。此外,泛素本身包含的七个赖氨酸残基也可以作为泛素的受体,从而形成多泛素链。在这些连接方式中,K48和K63连接方式已被充分研究。K48连接的多泛素化会靶向蛋白质进行蛋白酶体降解,而K63连接则调节信号事件、受体内吞和免疫反应。其他赖氨酸残基上的多泛素连接则不太显著,其生理功能仍大多未知。
LifeSensors开发了VU-1泛素单克隆抗体,能够识别多泛素化和单泛素化蛋白以及游离泛素。VU-1已被证明可以识别K48、K63、K11连接以及线性泛素链;其他连接方式尚未经过测试。
艾美捷[干冰]抗泛素单克隆抗体(克隆VU-1):
货号:VU-0101-0050
应用:
Western blot(1:1000)请参阅下方协议。
ELISA、IHC(1:200–1:500)
所有应用的最佳条件应由最终用户自行确定。
来源:从杂交瘤上清液中纯化。
亚型:IgG1(小鼠源)
纯度:>90%
克隆号:VU-1
提供形式:0.5mg/ml,PBS缓冲液,pH 7.2
特异性:抗体能够检测被多泛素化和单泛素化修饰的蛋白、线性泛素链以及游离泛素。由于泛素在真核生物中高度保守,抗体的反应性与物种无关。
规格:250ug,足以用于50次以上的Western blot实验。
储存:-20℃保存。避免反复冻融。
[干冰]抗泛素单克隆抗体(克隆VU-1)图片:
左图:Western blot分析链特异性和细胞泛素化偶联物,使用单克隆抗体VU-1。(A)K48、K63和K11连接的多泛素化偶联物;(B)40µg HEK293T细胞裂解物(50nM硼替佐米处理);(C)OLN细胞未处理(对照)和1µM MG132处理。细胞裂解物经SDS-PAGE分离后,使用VU-1抗体(B.1µg/ml;C.0.2µg/ml)进行免疫印迹。
右图:VU-1单克隆抗体在ELISA中检测未结合的泛素。未结合的泛素被涂覆在聚苯乙烯板上,封闭后与VU-1或FK2抗体(1µg/ml)孵育,随后加入抗小鼠HRP偶联物(1:5000)。加入ECL后,使用Envision平板阅读器读取结果。
文献参考:
1 Wilkinson, K.D., Regulation of ubiquitin-dependent processes by deubiquitinating enzymes. Faseb J, 1997. 11:1245-56.
2 Meulmeester E, et al Loss of HAUSP-mediated deubiquitination contributes to DNA damage-induced destabilization of Hdmx and Hdm2. Mol Cell.2005 18:565-76.
3 Faustrup H, et al. USP7 counteracts SCFbetaTrCP- but not APCCdh1-mediated proteolysis of Claspin. J Cell Biol. 2009 184:13-9.
4 Li M,et al. Deubiquitination of p53 by HAUSP is an important pathway for p53 stabilization Nature, 2002 416:648-53.
5.Seiberlich V. et.al. The small molecule inhibitor PR-619 of deubiquitinating enzymes affects the microtubule network and causes protein aggregate formation in neural cells: Implications for neurodegenerative diseases. Biochem et Biophys Acta, 2012, 1823;2057-2068.
免责声明
- 凡本网注明“来源:化工仪器网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:化工仪器网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源(非化工仪器网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。