实验用的抑制剂Cocktail怎么选？ 抑制剂Cocktail常见问题解答

① 蛋白质研究：

保持蛋白质的完整性并防止降解， 在蛋白质纯化过程中抑制不必要的酶活性

② 细胞培养： 

通过阻断参与细胞程序性死亡的途径， 维持细胞活力或防止细胞凋亡(细胞死亡)

③ 酶学检测： 

抑制背景酶活性， 确保准确测量特定酶反应

④ 组织保存： 

通过抑制导致组织分解 的酶来防止组织样本降解

⑤ 信号转导研究： 

阻断特定的信号传导途径， 研究它们在细胞过程中的作用

MCE 抑制剂 Cocktails

抑制剂 Cocktails 产品包含多种不同的酶抑制剂，可同时抑制多种酶活性。这些抑制剂可以针对细胞 内的多个信号通路或生物过程进行干预，以实现更的生物学研究目的。

抑制剂 Cocktails 可以应用的实验包括

免疫印迹 (Western Blot, WB),

免疫沉淀 (Immunoprecipitation, IP),

免疫共沉淀 (Coimmunoprecipitation, Co-IP), 

pull-down,

免疫荧光 (Immunofluorescence, IF),

免疫组化 (Immunohistochemistry, IHC),

激酶检测等。

产品推荐

1、HY-K0010

蛋白酶抑制剂

Cocktail  (Solution, EDTA-Free, 100× in DMSO) 

Ingredient：AEBSF、Aprotinin、Bestatin 、E-64、Leupeptin 、Pepstatin A

Function：适用于所有蛋白样品，可有效保护细胞及 组织裂解液中总蛋白的稳定

2、HY-K0011

蛋白酶抑制剂 片剂 (EDTA-Free)  Cocktail

Ingredient：AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64 、Leupeptin

Function：一片可用于 10 mL 样品, 适用于所有蛋白样品, 可有效保护细胞及组织裂解液中总蛋白的 稳定简单，便捷，便于保存

3、 HY-K0012

蛋白酶抑制剂 Cocktail, 细菌款 (EDTA-Free,100× in DMSO)

Ingredient：AEBSF 、Bestatin·E-64 、Pepstatin A

Function：用于细菌蛋白提取，可有效抑制细菌提取物中的 各种蛋白酶活性

4、HY-K0013

蛋白酶磷酸酶抑制剂  通用型 (EDTA-Free, 10× in ddH Cocktail， 2O)

Ingredient：Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin hemisulfate、β-Glycerophosphate、Sodium fluoride、Sodium orthovanadate、Sodium pyrophosphate   decahydrate

Function：质谱兼容，适用于所有蛋白样品，可以有效 抑制常规的细胞或组织提取物中的各种蛋白酶 和磷酸酶

5、HY-K0021

磷酸酶抑制剂 Cocktail l  (100× in DMSO)

Ingredient：(-)-p-Bromotetramisole oxalate、Cantharidin 、Microcystin LR  Microcystis aeruginosa

Function：信号通路研究，可有效抑制碱性磷酸酶和丝氨酸/ 苏氨酸磷酸酶，如：PP1、PP2A，用于维持蛋白 的磷酸化状态

6、HY-K0022

磷酸酶抑制剂 Cocktail Ⅱ (100× in ddH2O)

Ingredient：Sodium fluoride 、Sodium orthovanadate、Sodium tartrate dihydrate、Sodium molybdate、Imidazole、

Function：信号通路研究，可广谱抑制酸性、碱性和蛋白酪 氨酸磷酸酶 (PTPs)，用于维持蛋白的磷酸化状态

7、HY-K0023

磷酸酶抑制 Cocktail Ⅲ (100× in DMSO)

Ingredient：(-)-p-Bromotetramisole oxalate 、Cantharidin、Calyculin A

Function：信号通路研究，可有效抑制丝氨酸/苏氨酸磷酸酶 和碱性磷酸酶，用于维持蛋白的磷酸化状态

8、HY-K0017

激酶抑制剂 Cocktail

Ingredient：(-)-p-Bromotetramisole oxalate、Cantharidin、Calyculin A

Function：通用型蛋白激酶抑制剂，可用于检测激酶活性

9、HY-K0030

去乙酰化酶抑制剂 Cocktail  (100× in 70% DMSO)

Ingredient：Trichostatin A、EX-527、Nicotinamide 、Sodium butyrate

Function：用于维持蛋白的乙酰化状态

客户验证

常见问题解答

1. 如何选择适合实验的抑制剂 Cocktail？ 

根据实验需求选择适当的抑制剂 Cocktail。建议参考说明书抑制剂组分并根据实验中的目标蛋白和需要 抑制的酶类型进行选择。

2. 不同抑制剂 Cocktails 是否可以混用？MCE 的 3 种磷酸酶抑制剂如何选择？

可以混用，需要注意不同抑制剂之间、抑制剂与实验样品之间的兼容性。MCE 的 3 种磷酸酶抑制剂， HY-K0021、HY-K0023 配方中含有天然化合物且不溶于水，溶剂选择 DMSO。HY-K0022 含无机盐 可溶于水，溶剂选择超纯水。HY-K0021 和 HY-K0023 均为 HY-K0022 的有效补充，使用时建议选择组合 形式：HY-K0021 + HY-K0022 或 HY-K0022 + HY-K0023。也可以单独使用，但不推荐。

3. 抑制剂 Cocktails 对样品有何影响？

抑制剂 Cocktails 旨在保护样品中的蛋白质，防止其被降解。正常使用时不会对样品产生负面影响。若有 特殊样品，可以行预实验，观察其对样品的影响。

4. 使用抑制剂 Cocktails 时是否需要优化裂解缓冲液的配方？ 

一般情况下不需要对裂解缓冲液的配方进行大幅度修改，但为了确保最佳效果，可以根据实验需要对缓冲液 的 pH 值和成分进行微调。此外，加入抑制剂 Cocktails 时，确保其与裂解缓冲液充分混合以达到最佳 抑制效果。

5. 使用抑制剂 Cocktails 是否会影响下游实验？ 

正常使用情况下抑制剂 Cocktails 不会影响下游实验，如 WB、IP 等。但需注意控制使用量，避免过量 干扰实验。如果担心对特定实验步骤产生影响，可以进行预实验来评估。

6. 抑制剂 Cocktails 是否对所有酶类都有效？ 

MCE 抑制剂 Cocktails 含有多种抑制剂，能广泛抑制蛋白酶和磷酸酶，但对于特定的酶类，可能需要补充 特异性抑制剂。

7. 何时添加抑制剂 Cocktails？抑制剂 Cocktails 的用量如何确定？

 对于样品提取，应在实验早期阶段加入抑制剂 Cocktails，对于样品裂解应在裂解缓冲液加入同时加入 Cocktails，以确保对酶活性的有效抑制。抑制剂 Cocktails 的用量一般会在产品说明书中给出推荐浓度。 通常情况下，少量即可发挥显著效果。根据样品的体积和实验需求，按比例添加即可。

8. 发现抑制剂 Cocktails 抑制效果不理想，怎么办？ 

若发现 抑制剂 Cocktails 抑制效果不理想，可能是用量不足、添加时间不对或需要补充特定的抑制剂。 可以尝试增加用量、调整添加时间或调整抑制剂种类。

9. 如何保存抑制剂 Cocktails？ 

常规溶液形式的抑制剂 Cocktails 应在 -20°C 储存，避免反复冻融。使用时建议现配现用，可适当分装后 保存，减少冻融次数。蛋白酶抑制剂 Cocktail，片剂 (HY-K0011) 4°C 储存即可。

10. 抑制剂 Cocktails 均为 1 mL 包装，能否提供大包装？ 

MCE 抑制剂 Cocktails 以储液形式提供，实验需进一步稀释，大包装会增加污染风险，同时冻融次数增加 也可能会影响后续抑制效果，因此常规规格为 1 mL。MCE 也可根据需求提供大包装定制规格。

客户验证文献

[1] Nature. 2025 Mar;639(8054):438-446

[2] Nat Immunol. 2025 Mar;26(3):391-403.

[3] Nature. 2025 Feb;638(8052):1112-1121.

[4] Cell. 2025 Jan 9;188(1):157-174.e22.

[5] Cell. 2024 Sep 19;187(19):5238-5252.e20.

[6] Signal Transduct Target Ther. 2025 Mar 5;10(1):79.

[7] Cell Metab. 2025 Jan 10:S1550-4131(24)00482-0.

[8] Nat Biomed Eng. 2025 Feb;9(2):201-214.

[9] ACS Nano. 2025 Mar 19.

[10] Nat Commun. 2025 Mar 8;16(1):2333.

[11] Cell. 2024 Oct 31;187(22):6251-6271.e20.

[12] Cell. 2024 Sep 19;187(19):5238-5252.e20.

[13] Cancer Cell. 2024 Jun 10;42(6):968-984.e9.

[14] Nature. 2023 Apr;616(7956):357-364.

[15] Nature. 2023 Mar;615(7952):526-534.

[16] Nature. 2023 Mar;615(7951):349-357.