基于已知对泛素具有亲和力的蛋白质结构域,串联泛素结合实体(Tandem Ubiquitin Binding Entities,TUBEs)已被开发用于分离和鉴定泛素化蛋白。TUBEs对多泛素化结构的亲和力比单个泛素结合相关结构域(UBA)高出多达1000倍。此外,TUBEs对多泛素化蛋白具有保护作用,使其即使在相对低丰度的情况下也能被检测到。这些特性有效地“捕获”了处于多泛素化状态的蛋白质。
在溶液相中,TUBE 2对K63连接的四聚泛素的亲和力大约等于对K48连接的四聚泛素的亲和力(5-10 nM)。TUBE 2通过HIS6-SUMO标签高效偶联到琼脂糖上,避免了对UBA结构域的修饰。
艾美捷泛素串联结合实体2,琼脂糖偶联:
货号:UM-0402-1000
亲和标签:HIS6-SUMO
纯度:(偶联前)通过SDS-PAGE分析,纯度>95%
分子量:不适用
物理状态:50%树脂悬浮液(PBS,pH 7.5,20%乙醇)
数量:0.5 mL树脂
溶解性:不适用
储存:-20°C。避免在更低温度下储存。
应用:
从细胞系、组织和器官中捕获多泛素化蛋白
保护多泛素化蛋白免受去泛素化和蛋白酶体降解
泛素串联结合实体2,琼脂糖偶联图片:
文献参考:
1. Stormo, Adrienne ED, Farbod Shavarebi, Molly FitzGibbon, Elizabeth M. Earley, Hannah Ahrendt,Lotus S. Lum, Erik Verschueren et al 2022) "The E3 ligase TRIM1 ubiquitinates LRRK2 and controls its localization, degradation, and toxicity." Journal of Cell Biology 221, no. 4.
2. Hark, Timothy J., Nalini R. Rao, Charlotte Castillon, Tamara Basta, Samuel Smukowski, Huan Bao,Arun Upadhyay et al. (2021) "Pulse-chase proteomics of the App knockin mouse models of
Alzheimer’s disease reveals that synaptic dysfunction originates in presynaptic terminals." Cell
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