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UbiTest磁性TUBE洗脱试剂盒,确认靶蛋白的多泛素化

来源:武汉艾美捷科技有限公司   2025年05月27日 14:35  

UbiTest试剂盒用于确定靶蛋白是否被多泛素化。这一强大的平台是对研究蛋白质泛素化常用方法的改进:免疫沉淀和Western blot分析。然而,在免疫印迹步骤中,底物抗体通常会与底物的多泛素化形式产生不同的相互作用。这是由于表位掩盖、亲和力降低或选择性变化。一种更明确的证明蛋白质泛素化的方法是,在免疫印迹分析之前,将免疫沉淀与广谱去泛素化酶(DUB)消化相结合。经过DUB处理后,目标蛋白(POI)的信号增加,这清楚地表明该蛋白即使在未处理的样本中没有明确的反应性,也已被泛素化。为了避免因POI免疫反应性变化而可能产生的问题,UbiTest检测利用TUBEs来捕获多泛素化蛋白。TUBEs(串联泛素结合实体)是经过工程改造的串联泛素结合域,其与四聚泛素的解离常数在纳摩尔范围内。TUBE1已被证明能够结合所有8种连接类型。

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艾美捷UbiTest磁性TUBE洗脱试剂盒#UM-0411M-1000组成:

试管— TUBE 1(高容量磁性珠子)——1 mL悬浮液,建议用于1-2 mg总细胞裂解物的捕获,使用100 µL悬浮液。

缓冲液:PBSpH 7.220%乙醇

储存:请将磁性TUBE1保存在4°C。不要离心、干燥或冷冻珠子。

试管— 洗涤缓冲液——2 mL

试管— 洗脱缓冲液——1 mL

试管— 10X中和缓冲液(使用前加入β-巯基乙醇至最终浓度为10 mM,例如加入5 uL 1 M β-巯基乙醇溶液)——0.5 mL

试管— 广谱DUB——25 ug10 uM

储存:-80°C

本品已被引用1次。

 

UbiTest磁性TUBE洗脱试剂盒应用:

从细胞和组织提取物中方便地一步捕获多泛素化蛋白

分离多泛素化蛋白用于蛋白质组学研究

确认靶蛋白的多泛素化

真正的多泛素化证明——无需质谱

轻松比较处理样本之间的多泛素化水平

轻松筛选多个目标蛋白

无需底物纯化


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