液相色谱系统的溶剂管理系统负责提供合适的流动相,流动相通常由多种溶剂混合而成,如甲醇、乙腈、水等。不同的样品和分离需求需要不同组成和流动相。例如,在反相液相色谱中,流动相的会影响组分的洗脱顺序,组分洗脱能力越弱。泵在溶剂管理系统中起着关键作用,它能持续稳定地输送流动相,确保色谱过程的平稳进行。常见的泵有二元泵和四元泵,四元泵可混合输送四种溶剂,能更灵活地调整流动相组成。
进样系统负责将待分析的样品引入色谱柱。它需要准确控制进样量,以保证分析结果的准确性和重复性。现代液相色谱系统一般采用自动进样器,可按照预设程序准确抽取和注入样品,提高分析效率。
分离系统的核心是色谱柱,柱内填充有特定的固定相。固定相的种类多样,如硅胶、键合相等,不同类型的固定相适用于不同性质的样品分析。在色谱过程中,样品在固定相和流动相之间不断进行分配,各组分因与两相的作用力不同而逐渐分离。
检测系统用于监测和测定分离后的组分。常见的检测器有紫外检测器、荧光检测器等。紫外检测器通过测量样品对特定波长紫外线的吸收来定量分析组分,应用广泛;荧光检测器则基于样品的荧光特性进行检测,具有高灵敏度。
数据处理系统负责采集、处理和分析检测器输出的信号。它能记录色谱峰的保留时间、峰高、峰面积等信息,通过与标准品对比或使用相关软件计算,确定样品中各组分的含量和纯度等。

液相色谱系统的检定方法:
1.外观及完整性检查:
-检查各部件是否齐全,包括输液泵、进样器、色谱柱、检测器等,外观有无损坏、变形、腐蚀等情况。
-查看各连接管路是否完好,无破损、老化、泄漏等问题,确保管路连接紧密。
2.功能检查:
-输液泵:开启输液泵,检查其能否正常运转,有无异常噪声或振动。检查泵的压力显示是否正常,能否在设定的压力范围内稳定工作。同时,检查泵的流速调节功能,看是否能准确设置和稳定输出不同的流速。
-进样器:对于手动进样器,检查其操作是否顺畅,进样针是否堵塞或损坏,进样精度是否满足要求。对于自动进样器,除了检查进样针的状态外,还要检查其进样顺序、进样量的准确性和重复性等功能是否正常。
-检测器:不同类型的检测器检定方法有所不同。如紫外检测器,检查其光源是否正常发光,波长调节是否准确;荧光检测器要检查激发波长和发射波长的设置是否准确,灵敏度是否正常等。同时,检查检测器的基线是否稳定,有无异常噪声或漂移。
-色谱柱:查看色谱柱的外观是否有损坏,柱接头是否完好。检查色谱柱的标识是否清晰,包括柱长、内径、填料类型等信息。
3.系统适应性试验:
-理论塔板数测定:选择合适的标准物质,如萘等,配制成一定浓度的溶液,在规定的色谱条件下进样分析。根据色谱峰的保留时间和半高宽,计算理论塔板数,以评估色谱柱的分离效能。
-分离度测定:使用含有多种组分的混合标准溶液,在选定的色谱条件下进行分离分析。通过测量相邻两组分的保留时间、峰宽等参数,计算分离度,检查系统对不同组分的分离能力是否满足要求。
-重复性试验:连续多次进样相同浓度的标准溶液,观察各次进样的保留时间、峰面积或峰高等参数的一致性,以评估系统的重复性。
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