荧光染色法中常用的荧光染料有以下几种

特性：本身无荧光，进入活细胞后，被细胞内的酯酶水解生成有绿色荧光的 Calcein，可对活细胞进行标记，激发波长为 495nm，发射波长为 515nm。

优点：细胞毒性低，能快速进入细胞，染色效果稳定，可用于长时间观察细胞。

应用：常用于细胞活性检测、细胞追踪以及细胞内钙离子浓度变化的研究等。

特性：一种核酸染料，不能透过活细胞的细胞膜，但可进入死细胞，与双链 DNA 结合后，在 488nm 激光激发下发出红色荧光，发射波长为 617nm。

优点：与 DNA 结合特异性高，荧光强度高，可用于区分活细胞和死细胞。

应用：常用于细胞凋亡、细胞周期分析以及死活细胞鉴别等实验。常与其他活细胞荧光染料如 Calcein - AM 等联合使用，通过不同颜色荧光区分活细胞和死细胞。

特性：可穿透细胞膜，与 DNA 特异性结合，在紫外光激发下发出蓝色荧光。其中，Hoechst 33342 染色效果较好且细胞毒性相对较低，激发波长为 350nm，发射波长为 461nm。

优点：能对活细胞和固定细胞进行染色，可用于观察细胞核形态和细胞周期分布。

应用：常用于细胞凋亡检测、染色体分析以及细胞定位研究等。

特性：一种碱性荧光染料，可透过细胞膜进入细胞，与细胞内的 DNA 和 RNA 结合。在不同的酸碱度环境下，AO 与 DNA 和 RNA 结合后发出不同颜色的荧光。在 pH 7.4 的环境中，AO 与双链 DNA 结合发出绿色荧光，与单链 RNA 结合发出红色荧光，激发波长为 488nm，发射波长分别为 530nm（绿色）和 640nm（红色）。

优点：能同时对细胞中的 DNA 和 RNA 进行染色，通过观察不同颜色的荧光，可了解细胞内核酸的分布和状态。

应用：常用于细胞凋亡检测、细胞自噬研究以及区分正常细胞和肿瘤细胞等。在细胞凋亡过程中，细胞核内的 DNA 会发生断裂，由双链变为单链，吖啶橙染色后可观察到细胞核由绿色荧光变为红色荧光。