高剪切均质机和玻璃匀浆器破碎植物组织细胞

样品预处理

新鲜植物组织（如叶片、根、茎等）切成小块，样品的直径要小于分散刀头直径的1/2。

若样品较硬（如种子、木质部），可先进行预破碎（可选择WIGGENS的WMA系列组织到随机）再均质。

样品与缓冲液比例建议 1:5~1:10（w/v）（如 1 g组织 + 5~10 mL 缓冲液）。

均质操作

根据样品量选择合适的均质机和分散刀头小量样品。（WIGGENS的D-130型均质机可以在1.5ml离心管中处理样品，处理量0.2-1ml。 D500系列均质机处理量0.5L-8L。）

低速启动（5000~10000 rpm）初步破碎组织，避免飞溅。

高速剪切（15000~25000 rpm）处理 10~60 秒（可间歇操作，如 10 秒开 / 10 秒停，防止过热）。

推荐使用带有扰流板的均质杯，扰流板可以减少均质时间提高均质效率。

清洗设备

均质完毕后，需要对分散刀头和分散杯进行清洗，防止残留物堵塞或腐蚀。推荐使用WIGGENS超声波清洗机。

根据样品特性进行均质操作

柔软组织（如叶片）：较低转速（10000~15000 rpm）即可。

纤维/坚硬组织（如根、种子）：需更高转速（20000~30000 rpm）或延长处理时间。

多酚/多糖含量高的植物（如茶叶、果实）：易氧化或形成粘稠匀浆，可添加 PVP（聚乙烯吡咯烷酮） 或 β-巯基乙醇 减少干扰。

温度控制

冰浴操作，避免局部过热导致蛋白变性。如样品量较大，可分批次处理。

安全防护

戴 护目镜/面罩，防止样品飞溅。

确保分散头浸入液体，避免空转损坏设备。

样品预处理：使用蒸馏水或缓冲液清洁植物组织（如叶片、根等），切成小块（约0.5 cm²），若组织较硬，可先液氮冷冻后研磨成粉末，再转入匀浆器。

将组织块或粉末与适量裂解缓冲液（如PBS、Tris-HCl等，含蛋白酶抑制剂）加入匀浆器内管中，液体体积不超过1/3容量。

可根据需要选择手动匀浆或电动匀浆。手动匀浆，手握研杵垂直旋转，上下轻柔研磨（10-20次），避免气泡产生；或左右旋转研磨（适用于韧性组织）；电动匀浆：控制低速（500-1000 rpm），短时间间歇操作（避免过热）。

如有必要，操作过程需要对匀浆器进行预冷，操作要进行冰上操作，减少蛋白，核酸等降解。

玻璃匀浆器切记操作倾斜或用力过猛，容易导致玻璃匀浆器过度磨损或破裂

如果提取的细胞器破裂，需要减少匀浆次数或更换间隙更大的匀浆器

使用后立即用去离子水冲洗，酒精擦拭或使用超声波清洗机清洗，防止残留物干结。

双杵玻璃匀浆器有不同的杵钵的间隙，用于细胞器提取或核酸/蛋白提取