二手罗氏 LightCycler® 96 实时荧光定量PCR仪系统技术概述

一、引言

随着分子诊断和基因研究需求的不断增长，实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）技术在科研、临床检测、食品安全、生物制药等领域得到了广泛应用。PCR仪器作为该技术的核心设备，具有重要作用。在设备选型中，部分实验室选择使用二手仪器作为过渡或扩容方案，以控制成本并维持实验效率。

罗氏（Roche）推出的 LightCycler® 96 是一款广泛应用于科研和基础检测领域的中通量实时荧光定量PCR仪。其二手设备在功能结构、操作流程等方面基本保持完整，并在技术指标满足要求的前提下，仍可继续在标准实验环境中发挥作用。本文将从仪器构造、功能特点、使用优势、适用范围、选购建议等方面，全面介绍二手 LightCycler® 96 实时荧光定量PCR系统。

二、设备概况

LightCycler® 96 是罗氏分子系统产品线中的一款96孔qPCR平台，设计理念偏向通用性和稳定性，适用于中小规模实验室的日常基因定量任务。该设备集成了精准温控系统、四通道荧光检测模块以及数据分析平台，可支持常见的SYBR Green、TaqMan探针等反应体系。

主要技术参数如下：

三、构造与工作原理

1. 温控系统

设备采用双向帕尔贴（Peltier）技术，通过闭环反馈控制，确保PCR反应过程中的温度均一性与重现性。热盖系统自动压紧，防止样品蒸发，提升反应效率。

2. 荧光检测模块

光学系统具备四个独立检测通道，采用精密滤光片与光电探测器分光读取荧光强度，可实时监控多重扩增反应的荧光信号，适用于双通道或多通道实验设计。

3. 控制与数据分析

配套 LightCycler® 96 软件支持：

• 扩增曲线和荧光信号的实时可视化；

• Ct值自动判读；

• 标准曲线法、ΔΔCt法、相对/绝对定量分析；

• 熔解曲线分析，判断引物特异性。

四、二手设备使用价值分析

1. 经济性

二手LightCycler® 96 仪器通常原价50%甚至更多，对于预算有限的实验室是一种可行的扩展选择。若由正规渠道回收、翻新并经校准检测，设备仍可提供稳定的数据输出。

2. 适用性

二手设备在功能模块完整、光学系统正常、温控系统稳定的前提下，可应用于以下任务：

• RNA逆转录后的基因表达定量；

• 病原体DNA/RNA的检测；

• 突变筛查与多态性分析；

• 食品和水质中污染物的分子检测；

• 药物代谢基因分型研究。

3. 软件兼容性

配套软件无需订阅费用，支持在主流Windows操作系统下运行，兼容xlsx、csv、txt等格式数据导出，便于进一步统计分析或整合到LIMS系统中。

五、二手设备选购与使用注意事项

1. 购买渠道与检测报告

建议通过有资质的实验设备供应商采购，要求提供设备来源、校准报告、检测报告、功能测试记录，以及操作说明书等完整资料。避免通过非正规途径购入未经检测的设备，存在数据不稳定或电气故障等隐患。

2. 外观与结构检查

• 仪器应无明显磕碰或变形；

• 内部托盘无锈蚀或污染；

• 光路模块无损坏、无灰尘遮蔽；

• 显示屏、端口、按钮正常运行。

3. 功能测试建议

建议进行以下项目测试：

• 各通道荧光采集准确性；

• 温度梯度测试（96孔温控均匀性）；

• 实验复现性测试（3次重复反应Ct值标准差≤0.2）；

• 软件运行稳定性。

4. 易损件更换与保养

常见易损件包括热盖密封圈、光源模块、风扇等。建议定期检查并更换，以延长设备使用寿命。设备应在通风干燥环境中使用，避免强光、湿气、高温影响。

六、典型应用实例

1. 科研实验室

某高校生命科学实验室购入一台二手LightCycler® 96用于课题组日常基因表达检测。经过校准后，该设备可稳定运行，配合自制SYBR体系完成对植物转基因株系的筛选与分析。

2. 医院检验科

在病原体筛查方面，一些社区医院通过采购二手qPCR设备构建初步检测能力，对常见呼吸道病毒、HPV、人类疱疹病毒等进行初筛，随后送样至上级医院进一步确诊。

3. 食品企业质控实验室

某食品企业为检测成品中是否存在非法添加物质（如动物源成分、转基因成分），购置了二手LightCycler® 96 配合商业试剂盒，开展日常抽检和留样复测。

七、常见问题与解决方案

八、发展趋势与选型建议

随着数字PCR、微流控PCR等新技术的发展，传统qPCR平台逐渐融合更多自动化与微型化元素。然而，在预算有限、应用任务稳定的实验场景中，二手LightCycler® 96 仍具备实用价值。建议在以下情况下考虑采购：

• 实验室为教学或科研用途，对通量要求不高；

• 仅用于标准化重复实验，不涉及高通量筛查；

• 可配合已有反应体系与试剂平台，形成闭环工作流程。

九、总结

二手罗氏 LightCycler® 96 实时荧光定量PCR仪作为一款技术成熟、操作简便的中通量qPCR平台，若维护得当，仍可在常规分子生物学研究及基础检测中发挥良好作用。对于实验室预算有限、检测需求明确的单位，合理选购并科学使用二手设备，是提升实验效能、优化资源配置的一种现实路径。