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CheKine™ D-乳酸脱氢酶（D-LDH）活性检测试剂盒：精准评估 D-LDH 活性

来源：亚科因（武汉）生物技术有限公司 2025年05月21日 14:15

D-乳酸脱氢酶（D-LDH）是一种关键的糖酵解酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，尤其在肾脏中含量较高。它在生物体内参与 D-乳酸与丙酮酸之间的相互转化，并伴随着 NADH 和 NAD⁺的相互转化。这一酶的活性检测对于研究细胞代谢、肠道菌群代谢以及疾病诊断等具有重要意义。CheKine™ D-乳酸脱氢酶（D-LDH）活性检测试剂盒（微量法）以其性能，为科研人员提供了一种高效、精准的检测手段。

D-LDH 的生理功能与作用机制

D-LDH 在糖酵解和糖异生过程中发挥着重要作用。它催化 D-乳酸与丙酮酸之间的可逆转化，同时伴随着 NADH 和 NAD⁺的相互转变。在无氧条件下，D-LDH 将丙酮酸转化为 D-乳酸，为细胞提供能量来源。此外，D-LDH 还在维持细胞内氧化还原平衡中发挥关键作用。在肠道菌群代谢中，某些有益菌群（如双歧杆菌）通过 D-LDH 代谢 D-乳酸，有助于维持肠道的酸性环境，抑制有害菌的生长。

D-LDH 与疾病的关系

乳酸酸中毒

D-LDH 活性的异常升高可能导致乳酸酸中毒。在缺氧、线粒体功能障碍或某些遗传性疾病中，D-LDH 的活性可能会增加，导致 D-乳酸在体内积累，进而引发酸中毒。检测 D-LDH 活性有助于早期诊断和监测这些疾病。

肠道疾病

D-LDH 活性与肠道菌群的代谢状态密切相关。在炎症性肠病（IBD）等肠道疾病中，肠道菌群失衡可能导致 D-LDH 活性改变。检测粪便或血液中的 D-LDH 活性，可以评估肠道菌群的状态和肠道屏障功能，为疾病的诊断和治疗提供重要参考。

CheKine™ D-LDH 活性检测试剂盒（微量法）工作原理

CheKine™ D-乳酸脱氢酶（D-LDH）活性检测试剂盒采用比色法原理，利用 D-LDH 催化 D-乳酸与 NAD⁺反应生成丙酮酸和 NADH。NADH 在 340 nm 处具有强吸收峰，通过分光光度计测量吸光度值的变化，即可定量检测 D-LDH 活性。该试剂盒具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点，适用于多种生物样本，包括动植物组织、血清（浆）等。

操作使用要点

样本准备与处理

对于血清样本，需使用适当的抗凝剂采集血液，并及时分离血清，避免溶血和细胞破裂释放 D-LDH 影响检测结果。组织样本需准确称量后，利用适当的缓冲液进行匀浆处理，确保细胞充分破裂释放 D-LDH。细胞培养上清样本则需注意收集时间，确保 D-LDH 活性在检测范围内。

检测步骤

严格按照试剂盒说明书的操作步骤进行。首先将样本和标准品分别加入试剂盒的反应孔中，然后依次加入检测试剂，充分混匀后在特定温度下孵育一定时间。孵育完成后，使用分光光度计在 340 nm 处测量吸光度值，并根据标准曲线计算样本中 D-LDH 的活性。

质量控制与结果分析

每次检测应设置空白对照、阴性对照和阳性对照，以确保检测结果的准确性。对已知浓度的标准品进行重复检测，计算其变异系数（CV），一般要求 CV 控制在一定范围内，如小于 10%，以确保实验数据的稳定性和重复性。

试剂盒选择要点

检测原理与方法对比

目前市面上有多种 D-LDH 活性检测试剂盒，采用不同的检测原理，如比色法、荧光法和酶联免疫吸附试验（ELISA）等。CheKine™ 试剂盒采用的比色法具有操作简便、成本较低、检测快速等优点，适合大多数实验室常规使用。荧光法具有较高的灵敏度和特异性，但需要配备荧光光度计；ELISA 法操作相对复杂，检测时间较长。因此，在选择试剂盒时，应根据实验室设备条件、实验需求以及对检测灵敏度和速度的要求，综合考虑检测原理的适用性。

样本类型与适用范围

CheKine™ 试剂盒适用于多种生物样本，包括动植物组织、血清（浆）等。但在选择试剂盒时，需仔细阅读说明书，确保其与所检测的样本类型相匹配。例如，某些试剂盒可能仅适用于特定动物种属的样本或特定类型的细胞培养上清，以保证检测结果的准确性和可靠性。

灵敏度与检测范围评估

试剂盒的灵敏度和检测范围是影响检测结果准确性的关键因素。CheKine™ 试剂盒具有较宽的检测范围和较高的灵敏度，能够检测到样本中较低浓度的 D-LDH 活性变化。在选择试剂盒时，应了解其检测灵敏度和范围，并结合实验中预期的样本 D-LDH 活性水平进行选择。若试剂盒灵敏度不足，可能导致低浓度 D-LDH 样本的检测结果不准确或假阴性，从而影响对疾病早期诊断或代谢状态的评估。

试剂盒品质与稳定性考量

选择质量可靠、稳定性好的 D-LDH 活性检测试剂盒对于保证检测结果的准确性和重复性至关重要。在购买前，可查看试剂盒的用户评价、相关文献引用情况以及生产厂家的信誉和资质等信息，对试剂盒的质量和性能进行评估。该试剂盒经过严格的质量控制和性能验证，具有良好的稳定性和批次间一致性，能够为科研人员提供稳定可靠的检测结果。同时，注意试剂盒的保存条件和有效期，严格按照说明书要求进行保存和使用，以确保试剂的活性和性能不受影响。

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