培养基配方

培养基配方

常用培养基

（1）血液琼脂（血平板）：

   【配方一】    

   成分：普通营养琼脂90rot；脱纤维羊血(或兔血)10ml。

   制法：将已灭菌的普通营养琼脂(pH7.6>加热融化；冷却至50℃左右，以无菌手续加入10ml脱纤维羊血（临用前置37℃水浴箱预温），轻轻摇匀（勿使有气泡），倾注于灭菌平皿内，每一平皿(直径9 cm)13～15ml或分装试管，制成斜面；待凝固后，抽样置37℃培养18～24h，观察有无细菌生长；如无菌生长，置4℃备用。

   【配方二】

   成分：肉膏汤(pH7.8)800ml；硫酸镁(493g/L)8 ml；脱纤维羊血80ml；琼脂21～23g；5.0g/L对氨基ben甲酸8ml。

   制法：将肉膏汤置三角烧瓶内，加入硫酸镁、对氨基ben甲酸及琼脂，混合并使液体浸湿琼脂，121.3℃高压灭菌30分钟，取出冷至50℃左右，以无菌手续加入37℃水浴预温的无菌脱纤维羊血或兔血，轻轻摇匀，倾注平板，凝固后，抽样置37℃培养18～24h，如无菌生长冷藏备用。

（2）巧克力色血琼脂（巧克力平板）：

   成分：与血琼脂配方相同。

   制法：与血琼脂相同，但于培养基中加入血液混匀后，须再置85℃水浴10～15分钟，使血液的颜色由鲜红转变为巧克力色；取出并冷至50℃左右，倾注平板，经无菌试验后存4℃备用。

（3）麦康凯琼脂：分离肠道杆菌用。

   成分：蛋白胨20g；乳糖10g；10g/L的中性红水溶液5ml；氯化钠5g；琼脂20一25g；胆盐5g（或牛胆酸钠4g与去氧胆酸钠1g），加蒸馏水1000ml。

   制法：将蛋白胨、氯化钠、胆盐及乳糖加于500ml蒸馏水中加热溶解；将琼脂加于余下的500ml蒸馏水中加热溶解；将上述两液趁热混合，调整pH至7.4，以绒布过滤，按每瓶100ml分装，115.6℃高压灭菌20分钟，待冷却至50～60℃时，每100ml培养基中加入经煮沸灭菌的10g/L中性红溶液0.5ml，混合后倾注平板。

  注意事项：胆盐能抑制部分非病原菌及革兰氏阳性细菌的生长，但能促进某些革兰氏阴性病原菌的生长；因含有乳糖及中性红指示剂，故分解乳糖的细菌（如大肠杆菌），菌落呈红色；不分解乳糖的细菌，菌落不呈红色。

（4）伊红美蓝琼脂(EMB)：分离肠道杆菌用。

   成分：肉膏汤琼脂(pH7.4)100ml；20g/L的伊红水溶液(灭菌)2ml；乳糖1g；6g/L的美蓝水溶液(灭菌)1mI。

   制法：加热溶化已灭菌的肉膏汤琼脂，加入乳糖1g；待冷至50℃左右，加入伊红及美蓝溶液，混匀倾注平板，凝固后备用。

（5）罗氏培养基：分离结核杆菌用。

   成分：磷酸二氢钾(无水)0.96g；天门冬酰胺(天门冬素)0.72g；枸橼酸镁0.12g；硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.048g；纯甘油(中性)2.4ml；蒸馏水120ml；马铃薯粉6.0g，新鲜鸡蛋6～8个；10g/L的孔雀绿溶液8ml。

   制法：将磷酸二氢钾至纯甘油的各成份混合，置沸水中加热溶解，加入马铃薯粉，边加边搅拌，注意勿结成块，并继续在沸水浴中加热半小时，时加搅拌，待冷至65℃时加入全蛋液200ral及10g/L孔雀绿溶液8ml，充分混匀，分装于无菌试管，每管约5～6ml，塞上橡皮塞；置血清凝固器内经90℃1h，制成斜面。

（6）沙保弱氏培养基：培养真菌用。

   成分：蛋白胨10g；葡萄糖40g；琼脂20g；蒸馏水1000ml。

   制法：上述成份混合加热溶解（一般可不校正pH），分装试管，121.3℃高压灭菌15分钟，趁热制成斜面。如不加琼脂即为沙保弱氏液体培养基。

（7）葡萄糖肉汤：用于增菌。

   成分：酵母浸膏3g，构橼酸钠3g；牛肉汤1000ml；247g/L硫酸镁20ml；葡萄糖3g；磷酸氢二钾2g；5g/L对氨基ben甲酸5ml。

   制法：除葡萄糖及硫酸镁外，其他各物混和，加热溶解，校正pH至7.6，再煮沸5分钟，用滤纸过滤并分装于100ml三角烧瓶中，每瓶50ml，包扎瓶口，121.3℃高压灭菌15分钟；将葡萄糖配成100g/L的水溶液，硫酸镁配成247g/L的水溶液，分别高压灭菌（葡萄糖为113℃）15分钟，于每50ral、无菌肉汤内加入灭菌葡萄糖及硫酸镁水溶液各1ml混匀，于37℃培养48h。证明无菌生长后存于4℃备用。

（8）解脲支原体培养基：

 成分：牛肉浸液70ml；蛋白胨1.0g；NaCl 0.5g；KH2PO4 0.15g；4.0g/L酚红0.5mI。

 制法：调pH至6.0，加热融化后滤纸过滤，121.3℃高压灭菌，无菌加入小牛血清20ral；250g/L鲜酵母浸液10ml；青霉素20万单位；400g/L尿素（G3滤器过滤除菌）0.5ml，分装试管，每管4ml。如倾注平板，将上述液体培养基中加入琼脂粉1.0g。

从2011年开始我们致力于在生命科学领域、生物医学实验技术及论文润色服务，协助客户各类实验服务及论文润色十余年，是您值得信赖的科研合作伙伴!

如果您受时间、试验条件等限制而无法完成您的课题研究，欢迎您与我们联系。

实验技术服务：