细胞培养中的“小黑点”

细胞培养中的“小黑点”是什么？

经常培养细胞的同学们，可能都遇到过上图的情况，突然有一天，显微镜下发现培养基里有为数不少的“小黑杆”，它们有些知识随着液体晃动，有些会自主地在液体里迅速或者缓慢地游动。这些“小黑杆”，也会被我们的客户形象地称为“有黑色的虫子”。那这些“小黑杆”到底是什么呢？

出现“小黑点”最常见的可能

各类细菌

细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染，即使在细胞培养液中加入了抗菌素，也可能因为操作不慎而引起污染。常见的有革兰氏阳性菌，如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌。其中，不乏各类杆状细菌，在显微镜下这些杆菌看起来就像“小黑杆”一样。

培养细胞受细菌污染后，初期细胞仍能生长，但随着细菌的迅速增殖，会出现培养液变混浊，pH改变从而导致培养基颜色发生变化。随着污染的加重，细胞发生病理改变，胞内颗粒增多、增粗，后变圆脱落死亡。

出现“小黑杆”特殊情况

原虫为单细胞真核动物，在自然界分布广泛，种类繁多，约有近万种为寄生性原虫，生活在动物体内或体表。

细胞实验中细胞受到原虫污染后，培养基轻微浑浊，镜下可以观察到众多的细小点状物，轻微活动。细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮，在光镜下观察常可见到细胞核及胞浆内出现大小不等的颗粒或空泡。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养，但在污染初期原虫的数量少，细胞还能占据优势，所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。（对于原虫的定义，业内仍然存在一定的讨论空间，也有研究者认为原虫污染属于细菌类污染）

螨虫

螨虫属于节肢动物门蛛形纲广腹亚纲的一类体型微小的动物，身体大小一般都在0.5毫米左右，有些小到0.1毫米，大多数种类小于1毫米。世界上已发现螨虫（mite）有50000多种，仅次于昆虫。螨虫污染在细胞系培养中十分少见，常见于原代培养皮肤成纤维细胞时，形态呈杆状，能自主直线游动，速度相当快，常常源自实验动物的毛发中。

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